изследване

Слюнката като допълнителна среда за изследване е известна на ендокринолозите от повече от 40 години. Изследването на слюнка избягва събирането на кръв от вена и свързания с това стрес, болка на мястото на венепункцията, посещение на пациента на клиничното работно място или обратно клиничния персонал в домашната среда на пациента.

Събирането на слюнка се приема лесно от пациентите, неинвазивно и изисква минимално обучение. По този начин позволява събирането на множество проби за изследване на всякакви интра-индивидуални биологични вариации. Въпреки обещаващите аналитични ползи и предимства по отношение на разходите и сътрудничеството между пациентите, тестовете за слюнка не са навлезли в клиничната практика. Единственото изключение е кортизолът при диагностицирането на синдрома на Кушинг.

Събиране и анализ

Има два основни метода за събиране на слюнка - пасивно слюноотделяне и събиране на абсорбиращи вещества (обикновено памучен тампон или синтетичен тампон). Методологиите са сравнени в таблица №. 2. В клиничната практика и в повечето проучвания слюнката се събира с помощта на абсорбенти, от които впоследствие се получава чрез центрофугиране. Понастоящем се предлагат няколко тръби за събиране от няколко производителя. Всички системи използват тампони, които се вкарват за точно определено време (обикновено 1-2 минути) или под езика, или от вътрешната страна на бузата, където се накисват в слюнка и след това се вкарват в контейнера за събиране.

Поради своята стабилност в слюнката, стероидите са директно предназначени за определяне в слюнката. Дори когато се съхраняват при стайна температура, глюкокортикоидите и андрогените в "необработена" слюнка са стабилни няколко дни, което позволява изпращането на проби в лабораторията по пощата. Пептидите са по-взискателни за правилното предварително аналитично третиране на пробите - те се адсорбират в стените на тръбите в по-голяма степен, а освен това слюнката съдържа протеолитични ензими, които причиняват бързо разграждане на пептидните хормони. Загубите, дължащи се на адсорбция и разграждане, могат да бъдат предотвратени чрез използване на специални епруветки (т.нар. Нискобелтъчно свързваща криотруба) и добавяне на консерванти (напр. EDTA). Препоръчително е да се измери слюнка трансферин, за да се изключи възможното замърсяване на кръвта. Важно е лабораториите, изследващи проби от слюнка, да валидират матрицата на слюнката. Простото заместване на слюнката с анализи, които са предназначени предимно за измерване на стероиди в кръвта, обикновено води до неточности.

Показания и перспективи за клинична употреба на хормонални тестове в слюнката

Показания за изследване на хормони в слюнката са дадени в таблица №. 3.

Скрининг за хиперкортизолизъм (синдром на Кушинг)

Мониторинг на физиологични и патологични хормонални промени в спортната медицина

Понастоящем урината и кръвта са единствените приети телесни течности за антидопингови тестове - както съобщава Световната антидопингова агенция. Пробите от слюнка могат да отговорят на някои от спецификите на антидопинговите тестове - те са прости, неинвазивни, неутрални по отношение на половете и контролирани пряко. Не на последно място, те имат ограничени възможности за фалшифициране, което е основен проблем при тестване на проби от урина. Следователно е въпрос на време прегледът на екзогенно прилаганите стероиди (или други забранени хормонални вещества) в слюнката да разшири възможностите за антидопингов мониторинг на спортистите. Трябва да се отбележи, че слюнката вече често се използва за наблюдение на употребата на наркотици на работното място, в клиничната токсикология, наказателното право и в програмите за шофиране на наркотици.

Мониторинг на стероиди при пациенти с адренокортикален рак и лекувани с митотан

Митотанът е лекарството от първи избор при адювантна терапия при пациенти с адренокортикален рак - независимо дали след пълна резекция, рецидив или в случаи на неоперабилен и/или метастатичен АСС. Неговият ефект (директен цитотоксичен ефект върху адренокортикалните клетки и блокада на стероидогенезата чрез инхибиране на 20,22-десмолаза и 11β-хидроксилаза) индуцира адренокортикална недостатъчност, която изисква заместителна терапия с хидрокортизон. Нито серумен кортизол не може да се използва за проследяване на заместващото лечение, тъй като митотанът повишава нивата на свързващ кортизол глобулин (CBG) (поради това серумните нива на кортизол са повишени) или свободния кортизол в урината. Митотанът също така увеличава стероидния клирънс, така че нивата на свободен кортизол в урината се повишават и пациентите се нуждаят от 2-3 пъти по-високи дози хидрокортизон, за да постигнат адекватно заместване.

Определянето на нивата на АСТН може да се използва като индиректен индикатор, но трябва да се има предвид, че нивата се пулсират и потискат дълго време при пациенти с АСС с персистиращ хиперкортизолизъм. Слюнченият кортизол не се влияе от промените в CBG и, корелирайки с нивата на серум без кортизол, отразява по-точно заместителната терапия с хидрокортизон при пациенти, лекувани с митотан. Тук трябва да се подчертае, че избраната методология е течна хроматография под високо налягане (HPLC) с тандемна масспектрометрия (LC-MS/MS). Това е така, защото индуцираното от митотан инхибиране на стероидогенезата води до натрупване на междинни продукти и структурно подобни стероиди, които причиняват кръстосана реактивност (с ендогенни стероиди като 6β-хидроксикортизол, 21-дезоксикортизол, кортикостерон и кортизол-конюгирани производни на кортизола) (ECLIA методологии). електрохимилуминесцентен имуноанализ).

Определяне на пептидни хормони

Няма референтни стандарти в слюнката за повечето пептидни хормони. Този факт обикновено се използва при количественото определяне на пептидните хормони, когато те служат като обещаващи маркери на специфични заболявания на устната кухина и е вероятно да станат полезни при тумори на главата и шията и устната кухина.

Заключение

Клиничната полза от определянето на хормона в слюнката е неоспорима и подценена. Основната и най-често споменавана пречка е липсата на изследвания, стандартизация и референтни стандарти, но всички тези проблеми са препъни камъни при определянето на хормоните чрез „общи“ методи в „стандартните“ телесни течности. Надявам се, че определянето на хормони в слюнката ще се превърне в обща част от рутинната клинична ендокринологична практика.

Литература: