Прием на витамин С и неговият ефект върху избрани характеристики на човешките еритроцити

Автори: Juraj Krajčír1, Katarína Kučerová1, Jana Laceková1, RNDr. Терезия Калновичова, CSc.2, MUDr. RNDr. Анжелика Пузерова, д-р.3, RNDr. Любомира Тотова, д-р.4, MUDr. Mgr. Рудолф Драбек5, д.м.н. Д-р Яна Радошинска, 5,6

1 Медицински факултет, Университет Коменски в Братислава
2 I. Катедра по неврология, Медицински факултет, Университет Коменски и ООН в Братислава
3 Институт по нормална и патологична физиология на Словашката академия на науките в Братислава
4 Институт по молекулярна биомедицина, Медицински факултет, Университет Коменски в Братислава
5 Институт по физиология, Медицински факултет, Университет Коменски в Братислава
6 Институт за изследване на сърцето SAS в Братислава

Въведение

Способността на еритроцитите (червените кръвни клетки) да променят формата си - деформируемост - е важна за качеството на микроциркулацията и достатъчното подаване на кислород в тъканите, тъй като еритроцитите с диаметър 7,2 μm трябва да преминават през капиляри с вътрешен диаметър около 3-4 μm. Това свойство значително влияе върху жизнеспособността на червените кръвни клетки, притока на кръв и хемодинамиката като такава. Общоприето е, че вискозитетът на пълната кръв също зависи от деформируемостта на еритроцитите. Намалената деформация на еритроцитите може да доведе до проблеми с кръвоснабдяването на тъканите, тяхното оксигениране и съответно увреждане на органите (1).

Производството на азотен оксид (NO) е важен фактор, влияещ върху деформируемостта на еритроцитите. Този важен вазодилататор, който разширява кръвоносните съдове, се състои не само от съдови клетки, но и от самите червени кръвни клетки. Инхибирането на производството на NO води до нарушена деформация на еритроцитите, като донорите на NO я нормализират (2).

Витамин С е важно, водоразтворимо вещество, което участва в хидроксилирането на пролин и лизин в организма в колагена, синтеза на карнитин, метаболизма на тирозина, но преди всичко е много важен антиоксидант. Известни са трудове, които са изследвали ефекта на витамин С върху деформацията на еритроцитите, съответно при животински модели. при in vitro (извън живото тяло) условия (3, 4). Ефектът му върху деформацията на еритроцитите и кръвната хеморология при хората (in vivo условия) е неизвестен. Поради този факт, ние се фокусирахме в нашия експеримент върху ефекта от 3-седмичното приложение на витамин С върху деформацията на еритроцитите и производството на еритроцити NO, като същевременно проследяваме избрани параметри на антиоксидантния статус и оксидативния стрес при здрави млади хора.

материали и методи

Участниците в изследването от двата пола са били на възраст 20-33 години (n = 20), които са взели венозна кръв в епруветки, съдържащи антикоагуланта EDTA (Sarstedt) в началото на експеримента и след 3 седмици приложение на L-форма витамин С ( 1000 mg/ден, NATURAL, sro, Словашка република). Пълна кръв е използвана за определяне на производството на NO в еритроцитите. След центрофугиране на останалата кръв (850 g, 10 минути, 4 ° C) се събира плазма за биохимичен анализ на избрани параметри на антиоксидантен статус и оксидативен стрес. Еритроцитната утайка се промива 3 пъти с физиологичен разтвор, за да се получи фракция от чисти еритроцити, които се използват за измерване на тяхната деформируемост.

Степента на окислително увреждане се определя чрез измерване на маркери на окислително увреждане (TBARS, AGEs, фруктозамин, AOPP). Тези маркери се увеличават от оксидативен стрес, като оксидативният стрес е състояние, при което балансът в прооксидантно-антиоксидантната система е нарушен, което накланя баланса в полза на прооксиданти (относително преобладаване на свободните радикали над антиоксидантния капацитет). Известно е, че оксидативният стрес може да доведе до увреждане на биологичните структури, с увреждане на липиди, протеини, въглехидрати и нуклеинови киселини (включително ДНК). Маркерите за липидна пероксидация (реактивни вещества с тиобарбитурова киселина - TBARS) бяха измерени спектрофотометрично. Крайните продукти за усъвършенствано гликиране (AGEs) и фруктозамин се определят от маркери за карбонилен стрес. Продуктите за напреднали окислителни протеини (AOPP) бяха измерени като маркер за увреждане на окислителния протеин. За информация за състоянието на антиоксиданта се определят общия антиоксидантен капацитет (TAC) и плазмената феридна редуцираща антиоксидантна сила (FRAP). Всички измервания са извършени както е публикувано по-рано (5).

Деформируемостта на еритроцитите е определена чрез филтрационния метод и е представена като съотношение на броя на еритроцитите, преминали през филтър с размер на порите 5 µm от общия брой еритроцити преди филтриране (6). Производството на NO в еритроцитите е визуализирано с помощта на DAF-2 DA (диаминофлуоресцеин диацетат) флуоресцентна сонда и количественото определяне на флуоресцентния сигнал е оценено в ImageJ (6).

Всички резултати са представени като средно ± стандартно отклонение. Тествахме нормалността на данните с теста Shapiro-Wilk. Различията в данните преди и след приложението на витамин С бяха анализирани чрез сдвоен t-тест. Смятахме тези със р стойност по-малка от 0,05 за статистически значими.

Изследването е оценено и одобрено от Комитета по етика на Медицинския факултет на Карловия университет и Университетската болница Братислава на 15 февруари 2016 г.

Резултатите

Деформацията на еритроцитите е статистически значимо увеличена след 3 седмици на приложение на витамин С (Графика 1). Когато се измерва производството на NO в еритроцитите, също се наблюдава повишаване на витамин С след приложение на витамин С (графика № 2). Сред шестте маркера на антиоксидантния статус и оксидативния стрес наблюдаваме значителни промени само при фруктозамин, чиято плазмена концентрация се повишава след приложение на витамин С.

витамин

Графика 1: Деформируемост на еритроцитите. Статистическа значимост: * p Следвайте ни
на социални
facebook мрежа