Обобщение

разпределение

Предистория: Ролята на мастоцитите при алергични заболявания е добре известна. Поради тяхната инициираща и регулаторна функция в патогенезата на възпалителната реакция е възможно да се очаква тяхното присъствие на мястото на възпаление на лигавицата на храносмилателния тракт.

Цел: Авторите се фокусират върху изследването на наличието и разпределението на мастоцитите в биопсични материали от хранопровода на деца с клинична диагноза гастроезофагеална рефлуксна болест.

Комплект и методи: При 40 пациенти на възраст 5 - 19 години с клинична диагноза гастроезофагеален рефлукс, ние също направихме биопсия на лигавицата на хранопровода по време на гастрофиброскопия. Мастните клетки в биопсични материали от хранопровода на деца са изобразени по метода на акридин оранжевата флуорохромия и изследвани във флуоресцентен микроскоп.

Резултати: Мастните клетки в изследваните материали представляват променлива и дори доста богата клетъчна популация. Най-честата им поява се наблюдава в обхвата на разклоняващите се съдови папили на ламина проприа. Сравнително най-богатото представяне на тези клетъчни елементи винаги се намира в лигавицата на lamina propria, особено в близост до тънкостенни съдови профили, съответно. венул. Очевидно по-честа поява на мастоцити в епителния слой на лигавицата на хранопровода е регистрирана в 17 случая; това е комбинация с еозинофилия при деца с клинична диагноза гастроезофагеален рефлукс (8 пациенти), атопия (4 пациенти) и други заболявания на стомашно-чревния тракт (5 пациенти). Мастните клетки са изключително богат източник на локални модулатори в променливи и пролиферативни промени на потока в тяхната непосредствена близост.

Заключение: Картографирането на разпределението на мастоцитите в хранопровода на децата може да допълва съвкупността от знания за местните източници на сигнални молекули. Наличието на мастоцити може да бъде една от първите минимални промени в лигавицата при микроскопичен езофагит. Потенциалната прогнозна стойност трябва да бъде проверена при по-голяма група пациенти.

Ключови думи: мастоцити - хранопровод - гастроезофагеален рефлукс - еозинофилия - езофагит - деца.

Лек Обз, 59, 2010, бр. 6, 226 - 230.

Обобщение

Предистория: Ролята на мастоцитите при алергични заболявания е добре известна. Поради тяхната инициираща и регулаторна роля в патогенезата на възпалителните реакции може да се очаква да продължи присъствието си на мястото на възпаление на лигавицата в храносмилателния тракт.

Цел: Целта на изследването е да опише наличието и разпространението на мастоцитите в биопсичния материал на хранопровода от деца с клинична диагноза гастроезофагеален рефлукс (GER).

Пациенти и методи: 40 пациенти на възраст 5-19 години с епигастрална болка и клинични признаци на гастроезофагеален рефлукс, когато са насочени за гастрофиброскопия с биопсия на хранопровода. Мастните клетки в биопсичния материал са показани с флуорохромен акридинов оранжев цвят и изследвани във флуоресцентен микроскоп.

Резултати: Само 10 деца със симптоми на ГЕР са присъствали с микроскопичен езофагит според Кели.

Наличието на мастоцити в лигавицата или субмукозата обаче е установено при 27 деца. Освен това комбинацията от мастоцити и еозинофили в биопсията е открита при 8 пациенти. От тях само 5 са ​​били с микроскопичен езофагит. Нашите открития показват, че децата със субективни симптоми на ГЕР често не корелират с класическите хистопатологични находки на езофагит, а корелират с увеличен брой мастоцити и еозинофили. Те вероятно са важни за субективното възприемане на симптомите на ГЕР.

Заключение: Картирането на разпределението на мастоцитите в хранопровода на деца може да бъде допълнение към набора от знания за местните източници на сигнални молекули. Наличието на мастоцити може да бъде сред първите минимални промени в лигавицата при микроскопичен езофагит. Потенциалната прогностична сила на това откритие трябва да бъде проверена от по-голяма група пациенти.

Ключови думи: мастоцити, хранопровод, гастроезофагеален рефлукс, еозинофилия, езофагит, деца.

Лек Обз, 59, 2010, 6, с. 226 - 230.

Ролята на мастоцитите (MC) при алергични заболявания е добре известна. Поради тяхната инициираща и регулаторна функция в патогенезата на възпалителната реакция е възможно да се очаква тяхното присъствие на мястото на възпаление на лигавицата на храносмилателния тракт. Многобройни трудове доказват наличието на MC в хистологичен материал, напр. хроничен гастрит (28, 29) или болест на Crohn (15, 26). Ролята на мастоцитите в индуцираното от киселина увреждане на хранопровода (1, 2, 6, 19) също е потвърдена при експерименти с животни и по този начин тяхното присъствие в основата на гастроезофагеален рефлукс (GER), базиран на рефлуксен езофагит. Работата на някои автори посочва също така тясната връзка на МК с автономната нервна система и възможния дял от техните ефекти, напр. също за регулиране на стомашно-чревната подвижност и за развитие на функционални нарушения на храносмилателния тракт. Освен това мастоцитите синтезират растежен фактор на нервната система (NGF) (1, 3, 5, 8, 13).

Наличието на еозинофили в биопсични материали от лигавицата на хранопровода, вече в 1982 Winter и сътр. (33) го счита за първия хистологичен маркер на рефлукс на стомашната киселина. Според Kelly et al., При оценката на микроскопските находки в биопсични материали от хранопровода. (15) оценява еозинофилната инфилтрация на лигавицата, хиперплазията на базовия клетъчен слой на лигавицата и дължината на съдовата папила. Хистологичните изследвания на лигавицата на хранопровода дават възможност за диагностициране на т.нар микроскопичен езофагит, когато ендоскопските находки са все още отрицателни. При микроскопското изследване на хистологични срезове от биопсични материали от хранопровода на деца при ГЕР, голямо диагностично значение се приписва на по-висока честота на еозинофилни левкоцити както в сквамозния епител, така и в лигавиците на lamina propria и lamina muscularis mucosae. Въпреки това, в биопсичните материали от хранопровода, дори при минимални възпалителни промени на лигавицата на хранопровода при такива болни деца, може да се докаже появата на MC в същата топография (8, 14, 32).

Появата на MC в хранопровода е описана главно при животни (2), както и при експериментално увреждане на хранопровода от киселина (10, 24). MC арестът е добре известен и при няколко заболявания на храносмилателния тракт, напр. при хранителна алергия (1, 9, 25, 31), хипереозинофилия (19, 20, 26) или паразитни реакции (19, 21), но също така и при други нередности на стомашно-чревната подвижност (19). Тези факти ни накараха да разгледаме ролята на мастоцитите в лигавицата на хранопровода при деца със заболявания на храносмилателния тракт, особено с гастроезофагеален рефлукс и да ги определим в биопсични проби. Следователно в нашата работа ние обърнахме специално внимание на тази клетъчна популация.

Авторите се фокусират върху изследването на наличието и разпределението на мастоцитите в биопсични материали от хранопровода на деца с клинична диагноза гастроезофагеална рефлуксна болест.

В група от 40 деца (20 момчета и 20 момичета на възраст 5 - 19 години) с епигастрална коремна болка и с клинични признаци на гастроезофагеален рефлукс, ние също определихме наличието на микроскопичен рефлуксен езофагит при гастроезофагодуоденоскопия. Хващащи биопсии са взети от долната част на хранопровода с апарата Olympus GIF E. При оценката на наличието на микроскопичен езофагит в биопсични материали от хранопровода на деца, ние използвахме класификационна схема според Kelly et al.:

А. Индикатори за активност на възпалението на епитела:
Степен 0 - без неутрофили, ексудати, ерозии, язви,
1 - неутрофили, присъстващи в епитела под 20%, без ерозии, язви,
2 - неутрофили, присъстващи в епитела над 20% и/или ерозии или ексулцерации.
Б. Дължина на съдовата папила:
Степен 1 ​​- по-малко от 1/3 от разстоянието от основата до епителната повърхност,
2 - повече от 1/3, но по-малко от 2/3 от разстоянието от основата до епителната повърхност,
3 - повече от 2/3 от разстоянието от основата до епителната повърхност.
В. Количество клетки, присъстващи в базалната зона:
Степен 0 - дебелина на 1 - 2 слоя базални клетки,
1 - повече от дебелината на 2 клетъчни слоя, но по-малко от 20% от общата дебелина на епитела,
2 - повече от 20%, но по-малко от 50% от общата дебелина на епитела,
3 - повече от 50% от общата дебелина на епитела.

При изобразяването на MC в този орган, ние предпочетохме акридиновия оранжев флуорохромичен метод на Jagatic и Weiskopf (12), тъй като позволява надеждна идентификация на MC дори в рутинно фиксирани с формалдехид и вложени в парафин хистологични материали. За да се покажат еозинофилите, разрезите бяха допълнително оцветени с хематоксилин-еозин и Giems-Romanovsky. Извършихме микроскопски изследвания и фотографска документация на микроскопско устройство Jenalumar 2 (Zeiss, Йена, Германия).

Изследвахме проби от биопсия от 40 пациенти с епигастрална болка и клинични признаци на гастроезофагеален рефлукс. 27 от тях обаче са имали ГЕР без ендоскопска находка на рефлуксен езофагит.

При 10 пациенти с клинични признаци на гастроезофагеален рефлукс не е потвърден езофагит, но хроничен повърхностен гастридит, при други 2 деца чревна микоза и при едно дете състоянието е затворено като функционална диспепсия без ендоскопски и хистологични патологични находки.

Като цяло мастоцитите (MC) в пробите представляват доста богата клетъчна популация. Те се появиха като полиморфни, а именно овални, трапецовидни, неправилно многоъгълни или звездовидни клетки. В стратифицирания сквамозен епител тяхната поява е силно променлива, по-скоро под формата на отделни клетъчни елементи в целия епител, включително неговите основни слоеве. Мастните клетки се наблюдават главно в обхвата на съдовите папили на lamina propria mucosae, както под формата на отделни клетки, така и в по-малки групи. В по-дълбоките слоеве (lamina muscularis mucosae) обикновено се наблюдават само отделни неправилни мастоцити.

От всички пациенти с клинично подозрение за ГЕР (независимо от ендоскопския негативизъм на езофагита), Кели е имала микроскопичен езофагит при 10 пациенти, 1 умерен и 9 леки. При всички тези пациенти мастоцитите присъстват в епитела и в lamina muscularis и lamina propria mucosae, а при 5 пациенти еозинофили също присъстват в плоския епител (фиг. 1).

В изследваните биопсични материали от лигавицата на хранопровода на деца установихме съвсем незначителни изменения в епителния слой. Наличието на еозинофилни левкоцити в стратифицирания плосък епител е отбелязано в 8 случая; съответства на степен A-1 (т.е. по-малко от 20% от тези елементи). Нито веднъж не сме открили появата на ексудации, ерозии и улцерации. Само в 1 случай имаше признаци на ограничителна левкоплакия.

Специална група представляват хистологичните срезове, направени от биопсични материали, които не съдържат епителен слой, а само подлигавица и lamina propria mucosae. В тези случаи MC се съобщава при всички 13 пациенти.

В изследваната група не открихме положителна корелация между честотата на ГЕР и МК (само 55% от пациентите наблюдават наличието на МК). За разлика от това, при 10 пациенти с ГЕР и минимален микроскопичен езофагит, MC са присъствали в изследваните хистологични материали (т.е. 100% от пациентите) и винаги са били открити в стратифицирания плосък епител.

Диагностиката на микроскопичен езофагит при ГЕР не е лесна. Резултатите от клиничните изследвания обикновено корелират с констатациите в биопсичните материали. Естеството и интензивността на демонстрираните хистологични промени сега са до голяма степен стандартизирани въз основа на точна количествена и качествена регистрация на хистологичните находки в самия епител и lamina propria mucosae, респ. до muscularis mucosae (4, 15). Наличието на еозинофилни и неутрофилни левкоцити и особено повърхностни ерозии или язви не изисква специален коментар за тези реактивни промени (7, 29). Съществуват обаче и такива автори (3), които заявяват, че откритията на дори един еозинофил в епитела на 1 mm2 могат да се разглеждат като очевиден признак на езофагит. Други автори (15) смятат натрупването на еозинофилни левкоцити в субепителните слоеве на стената на хранопровода като убедително доказателство за тези възпалителни промени (22).

Предпоставка за правилна оценка на нашите хистологични находки са биопсични материали, при които повече или по-малко всички слоеве на лигавицата и субмукозата са в идеалния случай, за да могат правилно да се оценят както епителните слоеве, така и височината на съдовите папили. От този аспект, за нашите констатации за много по-честа поява на MC в сравнение с еозинофилните левкоцити в епитела, не е намерено съгласие в наличната литература, въпреки че няма справка за значителна роля на MC в промените в микроциркулацията на лигавицата след езофагеална киселина изгаряния при животни (2, 9, 24), включително действието на стомашния сок при хората-

те също така включват ефектите на вещества, освободени от MC, невротрансмитери, хистамин и азотен оксид върху промените в киселинността в дисталния хранопровод (2, 3, 24). Количествените проучвания (3, 10) при кучета и плъхове посочват ефектите на киселинността върху съкращаването на мускулите на стената на хранопровода; авторите заявяват, че промяната в интралуматичната киселинност е свързана с MC дегранулация или лизис на хранопровода, което според авторите би могло да играе важна роля в патофизиологията на рефлуксните феномени. Според нас това е особено забележително, тъй като MCs са едновременно изключително богат източник на „множество хормони“ (27) и се считат за важни модулатори по време на променливи и пролиферативни промени на потока в непосредствената им близост. Освен това при различни патологични ситуации се подчертава връзката им с функциите на еозинофилните левкоцити (25).

Наличието на еозинофили в ГЕР, както подчертават няколко автори (1, 4 - 6, 12, 17), също може да се разглежда като признак на алергична предразположеност на пациентите, респ. за част от изображението на т.нар хранителни алергии. Други автори (30) съобщават до 86% положителна корелация в честотата на Helicobacter pylori и MC при възпалителни промени на стомашната лигавица при деца.

Съвкупността от фактори, които пряко или косвено участват в регулирането на процесите на растеж, диференциация, жизненост или възможна постдиференциална трансформация на MC, несъмнено е много сложна. Все пак напр. нервният растежен фактор, който се синтезира в увредените тъкани, действа като фактор, стимулиращ селективен растеж не само върху локалните нервни компоненти и MC, но и върху други съседни клетъчни популации (11).

Когато се оценяват възможните патогенни ефекти на MC в даден контекст, струва си да се споменат и ефектите на други продукти на тези клетки. На първо място, това е хистаминът, който може да играе няколко роли като стимулатор на локалната митогенна клетъчна активност, включително MC и пролиферация на фибробласти (4, 31). Освен това именно хепаринът участва много ефективно в възстановяването на естествената електроотрицателност на вътрешната повърхност на кръвоносните съдове в зони с увреден епител (26). Има дори мнения, че химазите и триптазите, които са координирани с хистамин при активиране на МС, потенцират периферните ефекти на този амин (11, 10, 26, 27).

Във връзка с функционални разстройства на хранопровода, не може да се подцени и фактът, че МС в лигавицата на lamina propria мукоза обикновено са в тесен контакт с части от автономната нервна система. Има мнения, че микроанатомичните взаимоотношения между MC и ентералните нерви могат да се разглеждат като доказателство за множество взаимодействия както в регулацията на имунните процеси, така и в клетъчния статус на даден регион (19). Медиаторите, освободени от MC, могат да причинят нервно-медиирани промени, напр. поради промени в транспорта на йони, включително Cl- (1, 2, 6). Следователно, съображенията за възможни модулирани невронни ефекти върху рефлекторните механични движения по време на преминаване през хранопровода не трябва да липсват в дадения контекст.

Въз основа на нашите констатации при 10 пациенти с диагноза ГЕР и признаци на минимален хистологичен езофагит, където MCs са присъствали в стратифицирания сквамозен епител при всички пациенти, както и резултатите от експерименталната работа на авторите върху животни (2, 19, 24), може да се счита, че образът на предизвиканите от рефлукс промени на лигавицата на хранопровода включва и мобилизирането на МС с всички последици от потенциалното действие на медиаторите, освободени от тях. Картирането на разпределението на MC в хранопровода на децата трябва да се разбира като допълнение в съвкупността от знания за местните източници на химични сигнални молекули. Те също се използват в микросредата на органа като регулаторни фактори в рамките на съществуващите имуно-невро-хуморални сесии, както при физиологични, така и при патологични обстоятелства.

Разпределение на мастните клетки при биопсия от хранопровода при деца и юноши

1 Милан KUCHTA, 2.4 Mária SIROŤÁKOVÁ, 1.3 Emeše MAJOROVÁ, 3 Natália KUCHTOVÁ
(От 1II. Катедра за деца и юноши, Медицински факултет UPJŠ и Детска университетска болница, Кошице, ръководител на доц. Д-р М. Кухта, д.м.н., от 2-ри отдел по експериментална медицина на Медицинския факултет, UPJŠ, Košice 3Detská fakultní nemocnice, Košice, режисьор: д-р И. Урбанчикова, от Катедрата по хистология и ембриология, Медицински факултет, UPJŠ, Кошице, ръководител на проф. М. Помфа, д.м.н., кабинет)