• T. Stankovičová, E. Kráľová, Z. Slováková, L. Vojteková, A. Ondrašinová, Ľ. Okruhlicová1, N. Tribulová
  • Ефект на рибеното масло и аторвастатин върху кръвното налягане и избрани параметри на ЕКГ при плъхове hHTG
  • Ферма Обз, 79, 2010, 8, с. 204-208

ключови думи: hHTG - рибено масло - аторвастатин - кръвно налягане - ЕКГ.

рибено

Високите нива на общите липиди, особено на холестерола и триацилглицеролите при хората, често се обсъждат във връзка със заболявания на сърдечно-съдовата система. Ефективното намаляване на нивата на триацилглицерол, както и на други липиди, се оказа много полезно за намаляване на сърдечно-съдовия риск (1).

Дислипидемията (DLP), дислипопротеинемията, хиперлипопротеинемията са група от често срещани метаболитни заболявания. Те се характеризират с патологично повишени или намалени плазмени нива на липиди и липопротеини. Повечето DLP е наследствено, генетично обусловено нарушение на метаболизма на липопротеините, което се нарича първична дислипидемия. Факторите на околната среда също допринасят за развитието на дислипидемии, особено лоша диета, липса на движение, прекомерна консумация на алкохол, наднормено тегло и тютюнопушене. Основните клинични прояви на дислипидемии са клинични прояви на атеросклероза, исхемична болест на сърцето, мозъчно-съдови събития и исхемична болест на долните крайници (2). Хипертриацилглицеролемия (HTG) ни информира за повишената концентрация на липопротеинови частици в кръвната плазма (VLDL, IDL, хиломикронни остатъци), които имат проатерогенни свойства (3).

Самата цел на DLP лечението е не само да нормализира нивата на липидите в плазмата, но и да предотврати сърдечно-съдови събития, които са резултат от атеросклероза (3). В момента има три основни подхода за лечение на дислипидемия: диетично лечение, режими и използване на плазмени липидопонижаващи лекарства (2).

В нациите, които консумират повече рибно месо и други рибни продукти, е установено, че ако диетата съдържа по-висок дял на полиненаситени мастни киселини с дълги вериги (PNMK) (открити в рибеното месо), има значително намаляване на честотата на много сърдечно-съдови заболявания (4). В човешкото тяло PNMK се срещат в по-голяма степен в миокарда, ретината и мозъка и са от съществено значение за правилното функциониране на тези тъкани, техния растеж и функция и са важни модулатори на физиологичните процеси (5).

В организма различаваме два вида незаменими мастни киселини (ЕМС): омега-6 (производни на линолова киселина LA) и омега-3 (производни на линоленова киселина ALA) (4). Все още не е известно как отделните компоненти на рибеното масло допринасят за профилактиката на сърдечно-съдови заболявания. Механизмите на тяхното действие вероятно ще бъдат разнообразни и заедно засягат процесите на атеротромбогенеза (6) и вероятно включват едно (или повече) от следните: инхибиране на реактивността на тромбоцитите, намаляване на хемотаксиса на левкоцитите и адхезия на ендотелни молекули, ендотелна регенерация, подобряване на сърдечен кръвен поток, възстановяване на артериалния поток (7). Повишеният прием на рибено масло показва по-ниска честота на предсърдно мъждене и внезапна сърдечна смърт в клинични проучвания (8). В проучвания за контрол на рибите е доказано, че рибеното масло понижава кръвното налягане при лица с хипертония и хиперхолестеролемия (9). Данните от епидемиологични проучвания и текущи клинични проучвания с n-3 PNMK под формата на рибено масло показват тяхното значение при вторичната профилактика на сърдечно-съдови заболявания. Ефектът им е сравнен с хиполипидемия - статини (10).

За лечение на нарушения на липидния метаболизъм и други свързани патологични процеси, аторвастатин е лекарство с подходящ фармакологичен профил, което може да има благоприятен вторичен ефект при усложнения, възникващи при заболявания на сърдечно-съдовата система.

Основният механизъм на действие на статините е инхибирането на ензима хидроксиметилглутарил-КоА редуктаза (HMG-CoA), който предотвратява синтеза на холестерол в черния дроб. Ензимът HMG-CoA редуктаза катализира превръщането на 3-хидрокси-3-метилглутарил-CoA в мевалонова киселина, която се превръща в ключов елемент в този синтез на холестерол (11).

Аторвастатин понижава нивата на общия холестерол, LDL холестерола и аполипопротеин В при хомозиготна и хетерозиготна фамилна хиперхолестеролемия, първична хиперхолестеролемия и смесена хиперлипидемия. Редките, но сериозни странични ефекти, причинени от засягане на екстрахепаталния синтез на холестерол, включват миотоксичност.

Като генетичен модел на човешка хипертриацилглицеролемия бяха отгледани пражки плъхове с вродена хипертриацилглицеролемия (hHTG) (13). Vrána и Kadzová (13) откриха хипертония при плъхове hHTG. Тяхното проучване потвърди, че хипертриацилглицеролемията и хипертонията могат да имат подобни характеристики на регулаторния механизъм. Kunes et al. (14) установи, че кръвното налягане е по-високо и по-често при мъжете, отколкото при женските плъхове hHTG

В тази работа ние наблюдавахме кръвното налягане и електрическата активност на сърцето при плъхове hHTG и тествахме ефекта на аторвастатин и рибено масло върху тези параметри.

Използвани животни

В експериментите са използвани плъхове (мъжки) с наследствена хипертриглицеролемия (hHTG) на възраст 5 месеца (FA ASCR, Прага, Чехия). Плъхове Wistar (мъжки) без HTG (Dobrá Voda, SR) бяха използвани като контролни животни. Животните от двете групи получават рибено масло (Vesteralens, Норвегия) в доза от 2 капки на ден или аторвастатин (Zentiva, SR) в доза от 0,3 mg/10 l алкохолен разтвор перорално за два месеца. На контролните групи от плъхове hHTG и Wistar се дава физиологичен разтвор. Плъховете са били държани при същите условия и при един и същ режим на пиене, те са били третирани съгласно Закон №. 289/2003 Coll. SR.

Методи

Кръвното налягане е измерено 24 часа след последното прилагане на аторвастатин и рибено масло по метода на неинвазивния маншет на опашката съгласно KRALOVA, E. et al. (15).

От буден плъх е записана ЕКГ на крайник. За регистрация е използвана кутия от плексиглас, адаптирана към размера на животното. На дъното му бяха поставени 4 метални никелови електроди, които отчитаха ЕКГ от всички лапи на стоящ плъх. Маркировката на електродите и връзката им с устройството е идентична с тази на човек. За подобряване на проводимостта върху електродите беше нанесен слой електропроводим гел. ЕКГ се наблюдава и записва на устройство SEIVA EKG PRAKTIK (Прага, Чехия) и на компютър TOSHIBA (PC Tronic, Братислава, Словакия). Събирането и анализът на данни бяха извършени с програмата Seiva Veterinary Praktik (Прага, Чехия)

Оценихме промените в ЕКГ при отделни групи плъхове; амплитуда R, продължителност на QRS, QT интервал. Ние коригирахме продължителността на QT интервала към сърдечната честота, използвайки модифицирана формула на Bazett с нормализиращ фактор от 200 ms (16). Изчислихме дължината на QTc по формулата:

Резултатите се отчитат като средно аритметично със стандартно отклонение (x ± SD) (n - брой животни в група). Статистическата оценка беше обработена с помощта на несдвоения t-тест на Student (p? 0,05) с помощта на Microsoft Excel.

Кръвно налягане и сърдечна честота на плъхове

При 5-месечни мъже hHTG (Таблица 1) установихме статистически значимо увеличение на систоличното кръвно налягане (sTK) в сравнение с контролните нормотензивни мъже Wistar (Таблица 2) с непроменено диастолично кръвно налягане (dTK). В същото време установихме увеличение на сърдечната честота с 20-30 удара/мин при hHTG мъже.

Приложение на рибено масло (RO) или аторвастатин

(ATO) при плъхове hHTG значително намалява стойностите на sTK с 10 mmHg след RO и с 16 mmHg след ATO в сравнение с нетретирани hHTG животни (Таблица 1). Диастоличното налягане и сърдечната честота не се променят значително след RO и ATO приложение в hHTG групата.

В нормалната група на Wistar приложението на RO не променя значително кръвното налягане и честотата. ATO значително намалява диастоличното налягане с 14 mm/Hg и увеличава пулса с 36 удара/мин в сравнение с контролните мъже от Wistar (Таблица 2).

ЕКГ на плъхове

Анализът на ЕКГ от hHTG (таблица 3) и плъхове Wistar (таблица 4) установява, че при мъжете hHTG амплитудата на R трептенията е значително увеличена (0,53 ± 0,04 mV срещу 0,38 ± 0,12 mV) и удължава продължителността на QT и QTc интервала . Продължителността на QRS комплекса при плъхове hHTG не се променя значително в сравнение с нормотензивните Wistar контроли.

Прилагането на FO върху hHTG мъже значително намалява амплитудата на R трептене (0.49 ± 0.14 mV срещу 0.53 ± 0.04 mV) и съкращава продължителността на QT интервала и QTc интервала в сравнение с контролните hHTG животни (Таблица 3). След прилагане на ATO при hHTG мъже, амплитудата на R-вълната намалява (0.41 ± 0.15 mV срещу 0.53 ± 0.04 mV), ATO съкращава продължителността на QT интервала (Таблица 3), макар и не толкова значително, колкото RO, продължителността на QRS комплекс и QTc интервал не се променят. От ЕКГ анализа установихме незначителни промени в интервала на QT, QTc и QRS комплекс при нормотензивни мъже след прилагане на аторвастатин (Таблица 4).

При плъхове hHTG наблюдаваме статистически значимо увеличение на sTK, а на ЕКГ увеличение на амплитудата на R и удължаване на QT в сравнение с нормотензивните плъхове Wistar. Експериментално намаляване на sTK с 15 mmHg експериментално се наблюдава при hHTG плъхове, третирани с RO в сравнение с контролни плъхове (17). В нашето проучване лечението с рибено масло значително намалява нивата на sTK при плъхове hHTG, докато при плъхове Wistar sTK е почти непроменен.

Прилагането на аторвастатин намалява кръвното налягане (18 и 19) и може да действа като вторична превенция срещу атеросклероза. Открихме същия ефект върху систолното кръвно налягане след приложение на аторвастатин в нашето проучване при плъхове hHTG. Положителните ефекти на аторвастатин върху съдовата стена се обясняват с увеличаване на колагеновите влакна и намаляване на количеството еластин в аортата (20). Сравнението на стойностите на кръвното налягане след приложение на RO и ATO показва, че ATO е по-ефективен при мъжки hHTG, тъй като намалява систолното и диастоличното налягане повече от RO. При мъжете от Wistar ATO само по-ефективно намалява диастолното кръвно налягане в сравнение с RO. Освен това, наблюдавахме незначително забавяне на пулса при hHTG мъже, лекувани с RO и ATO. Наблюдавахме също същото забавяне на сърдечната честота при мъжете от Wistar при RO. ATO повишава сърдечната честота в сравнение с контролите, което може да е свързано с лек стрес при измерване на кръвното налягане.

Дължината на QT интервала ни информира за продължителността на електрическите събития в камерите. Удължаването на QT интервала може да се дължи на промени в миокардната структура при hHTG животни. По този начин, в допълнение към леко повишеното кръвно налягане, плъховете hHTG изглежда имат хипертрофия на лявата камера. Наличието на миокардна хипертрофия също предполага увеличаване на амплитудата на R при плъхове hHTG. Продължителният QT интервал е рисков фактор за дисритмии.

Някои проучвания (21) съобщават за увеличаване на сърдечната честота и промени в продължителността на QT интервала при плъхове hHTG. Прилагането на RO при мъже hHTG причинява значително скъсяване на QTc интервала и връщане на амплитудата на R до контролни стойности. Прилагането на RO при нормотензивни мъже Wistar е причинило скъсяване на QT интервала в сравнение с контролите. От публикуваните досега резултати може да се заключи, че рибеното масло (или омега-3 полиненаситените мастни киселини) намалява податливостта на здрав, но също така и исхемичен миокард към аритмии (22).

Докато някои автори (23) не съобщават за промени в сърдечните параметри, други (21) описват съкращаване на QT интервала след приложение на аторвастатин и неговия антидисритмичен ефект. Пракаш Деедвания и др. (24) сочат към антиисхемичния ефект на аторвастатин. Други проучвания съобщават за значително намаляване на миокардната хипертрофия и фиброза след лечение с аторвастатин и предполагат лекарствено взаимодействие със системата ренин-ангиотензин (25). В нашите експерименти наблюдаваме съкращаване на продължителността на QT интервала и намаляване на R-вълната след прилагане на АТО в сравнение с контрола в двете групи. Сравняването на ефекта на ATO с RO предполага, че RO по-ефективно съкращава продължителността на QT интервала и в двата модела.

hHTG причинява значително увеличение на sTK, увеличаване на сърдечната честота, удължаване на QT и QTc интервала и увеличаване на амплитудата на R трептене при мъжки плъхове. Това предполага, че hHTG причинява хипертония, тахикардия при мъжете и може да доведе до инфаркт на миокарда. ATO намалява систоличното кръвно налягане в по-голяма степен, докато рибеното масло има по-голям ефект върху електрическите прояви на сърцето и съкращава QT и QTc интервала.

Благодаря
Творбата е създадена с финансовата подкрепа на безвъзмездни средства: VEGA 2/6064/26, 1/4244/07, APVV 51-059505.

Литература

T. Stankovičová, E. Kráľová, Z. Slováková, L. Vojteková, A. Ondrašinová, Ľ. Окрухликова, Н. Трибулова
Катедра по фармакология и токсикология, Фармацевтичен факултет, Карлов университет, Братислава
Институт за сърдечни изследвания, SAS в Братислава

T. Stankovičová, E. Kráľová, Z. Slováková, L. Vojteková, A. Ondrašinová, Ľ. Окрухликова, Н. Трибулова