Как да се ориентирате правилно в сложния „свят“ на липопротеините? Авторите на статията Станислав Оравец, Чудовит Гашпар, Марек Кучера и Петер Сабака от II. Клиника по вътрешни болести LFUK - UNB Братислава ще ни разкаже повече за отделните методи на изследване, правилната идентификация на субектите и диагностичните явления.
В началото на новото хилядолетие кристализира нова изследователска платформа: идентифицирането и количественото определяне на такива липопротеинови образувания в плазмения липопротеинов спектър, чието присъствие в съответни количества уврежда ендотелните клетки, предизвиква ендотелна дисфункция и инициира процеса на дегенеративни промени в кръвоносните съдове. Последицата от този процес е образуване на атероматозни съдови плаки. Говорим за атерогенни липопротеини. Тяхното изобилие в плазмата характеризира липопротеиновия спектър фенотип В. В него малките плътни липопротеини с ниска плътност (mdLDL) са богати и участват в развитието на исхемично артериално увреждане. Ако атерогенните липопротеини присъстват в серумния липопротеинов спектър в малки количества, се образува образ на неатерогенния липопротеинов профил фенотип А. (1)
Разработени са няколко метода за идентифициране на атерогенни липопротеини (градиентна гел електрофореза, ултрацентрифугиране, магнитно-резонансна спектроскопия), но поради технически и финансови възможности, непропорционално дълги времена за анализ и високи оперативни разходи, тези методи се използват главно в основни изследвания. Поради рутинното разширяване на идентификацията на атерогенни липопротеинови образувания липсват прости методологични процедури и възможностите за тяхното разширяване в ежедневната лабораторна практика остават ограничени.
Важен етап в рутинния лабораторен анализ и използването при диагностицирането на нарушения на метаболизма на липопротеините стана електрофоретичен метод за разделяне на липопротеини върху полиакриламиден гел (PAG), Lipoprint LDL система. (2) Позволява анализ на 12 липопротеинови образувания:
- VLDL - липопротеини много ниска плътност
- IDL 1 - 3 - подфракции на 1 - 3 липопротеини междинна плътност
- LDL 1-7 - субфракции на 1-7 липопротеини ниска плътност а
- HDL - липопротеини висока плътност
Методът за разделяне на липопротеините на PAG идентифицира атерогенни и неатерогенни липопротеинови образувания и определя атерогенните vs. неатерогенен липопротеинов спектър. Фенотип В срещу фенотип А.
Атерогенните липопротеинови спектри се характеризират с богато представяне на атерогенни липопротеини: много ниска плътност (VLDL), междинна плътност IDL1 и IDL2 и особено наличието на малки плътни липопротеини с ниска плътност т.нар. "Малки плътни LDL". Това са силно атерогенни LDL субпопулации, които образуват фракции от LDL 3 - 7. Както подсказва името им, те са по-малки, диаметърът им е по-малък от 26,5 nm, съответно. 265 ангстреми и плуват в диапазона на плътността d = 1,048 - 1,065 g/ml, т.е. по-висока от LDL1, LDL2. На разделителния полиакриламиден гел ги идентифицираме като фини ивици от анодната страна на гела, точно зад HDL, които мигрират в главата на разделените липопротеини.
Малките плътни LDL са по-атерогенни за (3, 4):
- намалено разпознаване от LDL рецептори (промени в конфигурацията от A до B) →
- повишена готовност за окисляване и ацетилиране →
- LDL оксид
- освобождаване на провъзпалителни цитокини
- апоптоза на мускулните клетки - LDL оксид
- освобождаване на металопротеинази
- разграждане на колаген - LDL оксид
- повишена готовност за поемане от макрофаги (рецептори за почистване)
- стимулиране на образуването на пяна клетки - по-лесно проникване в субендотелното пространство и образуване на холестеролни отлагания
Основна полза от електрофоретичния метод за идентифициране на атерогенни и неатерогенни липопротеини е идентифициране на четири основни типа в липопротеиновия профил:
Тип 1 Нетеатрогенна нормолипемия
Тип 2 Неатерогенна хиперлипопротеинемия
Тип 3 Атерогенна нормолипемия
Тип 4 Атерогенна хиперлипопротеинемия
Най-често срещаните липопротеинови съзвездия
Тип 1 и Тип 4 характеризират често срещаните и най-често представени липопротеинови съзвездия:
- нормолипемия, като оптимално (нетрогеногенно) липопротеиново съзвездие, което гарантира непокътнатостта на ендотелната хомеостаза и
- хиперлипопротеинемия (атерогенна), която уврежда ендотелната хомеостаза и ускорява процеса на атерогенеза в артериите, което води до съдово събитие в коронарната артерия в сърцето, в съдовете на мозъка или атеросклеротична оклузия на периферните артерии.
Неатерогенна хиперлипопротеинемия
Новият аналитичен метод идентифицира нова диагностична единица тип 2 липопротеинов спектър, т.е. Неатерогенна хиперлипопротеинемия. Това са хора с повишени нива на LDL холестерол в подфракциите LDL 1 и LDL2. Повишените нива на LDL1 и LDL2 не са свързани със значителни дегенеративни промени в коронарните и мозъчните артерии. Тези хора се нуждаят от индивидуален режим на лечение, с акцент върху режими на хранене и упражнения, при които радикалното намаляване на общите нива на холестерола не е абсолютно необходимо. (5)
Атерогенна нормолипемия
Също атерогенната нормолипемия, липопротеинов спектър тип 3, е ново диагностично явление. Срещаме го при пациенти, лекувани с хиполипемика, при които фармакологично постигаме намаляване на общия холестерол, но атерогенните, особено малките плътни LDL продължават да съществуват в плазмата. Втората група с атерогенна нормолипемия се състои от малка група млади нормолипемици с положителна фамилна анамнеза за миокарден инфаркт и инсулт при по-възрастни членове на семейството.