Значение и диагностика на антифосфолипидни антитела при жени с репродуктивни нарушения
Резюме:
Антифосфолипидните антитела се свързват с фосфолипиди или с фосфолипидно-протеинов комплекс. Наличието на тези антитела може да доведе до образуване на тромбоза и нарушения на бременността, което е симптом на невъзпалително автоимунно заболяване - антифосфолипиден синдром. Основните лабораторни критерии за антифосфолипиден синдром включват кардиолипинови антитела и антитела срещу ß-2-гликопротеин I. Други видове антитела, открити в серумите на пациента, са антитела към фосфатидилсерин, фосфатидилетаноламин, протромбин или анексин V. Точният произход и развитието на тези антитела не е следователно има известни дискусии кои антитела са най-често срещани при пациенти с антифосфолипиден синдром и кои трябва да бъдат включени в основните критерии. Следователно, нашата цел беше да наблюдаваме появата и ефекта на антифосфолипидни антитела при жени с репродуктивни нарушения и да наблюдаваме лечението на антифосфолипидни антитела.
Ключови думи: антифосфолипидни антитела, антифосфолипиден синдром, безплодие
* Всички таблици, графики и фигури, които са част от статията, могат да бъдат намерени в прикачения PDF файл в края на изследването.
Въведение
Отрицателно заредените фосфолипиди са съществен компонент на всички мембрани и следователно са подходящ антиген за антифосфолипидни антитела (APLA) (1). Тези антитела също се свързват с протеини, които образуват комплекси с фосфолипиди, които ние включваме
Високата хетерогенност на APLA и тяхното влияние върху хода на бременността са причина за аборти или преждевременни раждания. Много лекари обаче не вземат предвид патологичния ефект на имунната система върху репродукцията. Следователно целта ни беше да посочим важността на APLA, особено тези, които са включени в "некритериите". В този проект се фокусирахме главно върху наблюдението на честотата на APLA при жени с диагноза безплодие и лечението на тези антитела.
Материал и методология
Групата се състоеше от 1246 пациенти (възраст: 20 - 50 години) с диагноза безплодие без лечение. Серумът е получен от кръв, събрана в затворена система за събиране на гел по време на първия преглед. Наблюдавахме осем типа антифосфолипидни антитела в пациентските серуми, наблюдавайки анти-ß2GPI и ACLA от основните критерии и антитела от "некритериални": антитела срещу фосфатидилсерин, фосфатидилетаноламин, фосфатидна киселина, анексин V и IgG и IgM антитела срещу протромбин. За да определим APLA, използвахме количествен ELISA метод, базиран на взаимодействието антиген-антитяло (anti-β2GPI - ORGENTEC, ORG 521S; ACLA - ORGENTEC, ORG 515S; антифосфатидна киселина - Delta Biologicals Srl, дъщерно дружество на ERBA Diagnostics, CA-206; антианексин V - IMTEC, ITC59550; антифосфатидилсерин - IMTEC, ITC59027; антифосфатидилетаноламин - IMTEC, ITC59400; антипротромбинов IgG/IgM - AIDA, REF 10229). Серумите се съхраняват във фризер под -18 ° C. Антигенът (например β2GPI) е свързан с твърдата фаза и се инкубира с проби, калибратори и контроли, които съдържат първични антитела, които взаимодействат с антигена върху твърдата фаза. Впоследствие първичните антитела се лекуват
свързва вторичната, към която е свързан конюгатът (пероксидаза от хрян). Резултатът се определя спектрофотометрично (10).
Статистически оценихме получените резултати, използвайки статистическата програма StatsDirect Statistal Analysis Software. В случай на качествени данни, ние преброихме само процентилите. За анализи, базирани на лечение, първо определихме нормалността на данните със StatsDirect и след това избрахме статистическия тест на Ман-Уитни (проследяване на ефикасността на лечението на антитела към фосфатидилсерин, фосфатидилетаноламин, анексин V и протромбин IgG) за ненормално разпределение на данните. При проследяване на лечението за антитела срещу IgM и ß2GPI открихме нормално разпределение на данните, така че използвахме сдвоен t-тест. Смятахме резултатите за статистически значими, когато р-стойността беше по-малка от 0,05.
Резултатите
От 1246 пациенти, 24% са жени, положителни за всяко APLA антитяло (Маса 1). От основните критерии най-често се срещат антитела срещу ß2GPI (1,13%). ACLA се наблюдава само при 0,40% от пациентите, което го прави най-ниският дял от всички APLA, които сме следвали. От "некритериалните" антитела срещу фосфатидилсерин са най-често срещаните (12,43%). Тези антитела имат най-висок дял от всички наблюдавани APLA. IgM антителата към протромбин са положителни при 8,51% от пациентите, а IgG антипротробиновите антитела са положителни при 5,58% от пациентите. Антителата към плацентарния протеин на анексин V са положителни при 1,59% от жените, докато фосфатидилетаноламиновите антитела са положителни при 0,92% от пациентите. От "некритериалните" антитела срещу фосфатидната киселина са най-слабо представени, което е положително само при 0,70% от жените, което е с 0,30% по-високо в сравнение с ACLA. Делът на отделните антитела може да се види в таблица 1.
ACLA като най-слабо представените антитела има най-висока комбинация с друг тип APLA (100%). Те са най-чести в комбинация с антитела към ß2GPI и фосфатидилсерин (и двата 80%). Фосфатидилетаноламиновите антитела са били в комбинация с други APLAs в 81,82%, като най-висока е била антителата срещу фосфатидилсерин (88,89%). Антителата към фосфатидната киселина са комбинирани с други APLA при 2 от 3 положителни пациенти. Те са имали до 100% комбинация с ACLA, анти-β2GPI и фосфатидилсеринови антитела. Анти-β2GPI антителата са положителни с множество антитела при 42,86% от пациентите. Те са имали най-честата комбинация с ACLA и фосфатидилсеринови антитела (и двете 66,67%). Протромбиновите IgG антитела са по-чести (32,31%) в комбинация с други APLA, отколкото IgM протромбиновите антитела (30,30%). IgG антителата срещу протромбин са предимно в комбинация с антитела срещу фосфатидилсерин и IgM антитела срещу протромбин (и двата 47,62%). IgM са най-често в комбинация с анти-фосфатидилсеринови антитела (43,33%). Фосфатидилсериновите антитела имат най-нисък процент в комбинация с други антитела (28,19%), докато те са най-положителни при IgM антитела срещу протромбин (30,95%). Резултатите могат да се видят в таблица 2.
В допълнение към появата на отделни APLA, ние наблюдавахме тяхната поява по отношение на възрастта. Разделихме пациентите на 4 възрастови групи: 20 - 29 години, 30 - 35 години, 36 - 40 години и 41 - 50 години. Наблюдавахме зависимостта на антителата от възрастта само в случай на антитела срещу ß2GPI и протромбинов IgG (графика 1). В допълнение, антителата срещу анексин V са по-високи при по-възрастните жени, но разликата не е статистически значима. Поява на други
антителата не зависят от възрастта. Въз основа на наличната информация за пациентите, ние избрахме група пациенти, при които беше възможно да се наблюдава ефектът от лечението върху честотата на APLA. Тези жени са били лекувани с LMWH (нискомолекулен хепарин), аспирин, витамин D и кортикоиди. Наблюдавахме съдържанието на антитела преди началото на лечението и съдържанието на антитела след началото на лечението. В допълнение към IgG антитела към протромбин, всички пациенти са имали намаляване на APLA след започване на лечението (Таблица 3). Някои пациенти са били положителни за множество APLA едновременно и във всички случаи е имало намаляване на антителата след започване на лечението, които са били повишени преди лечението. В някои случаи обаче се наблюдава покачване на други видове антитела след лечение, които не са били положителни преди лечението. Антителата към анексин V и двата изотипа на протромбиновите антитела са най-често увеличавани. Някои пациенти са забременели след започване на лечението, но няма точна информация за спада на безплодието и успеха на бременността поради края на проучването преди получаване на тази информация.
Дискусия
В нашето проучване разгледахме честотата на APLA при жени с репродуктивни нарушения. Тези антитела са отговорни за спонтанни аборти, вътрематочна фетална смърт, прееклампсия или венозна тромбоза (2). От 1246 жени 24% са положителни за някои
от APLA. Антителата срещу ACLA и анти-ß2GPI са сред основните критерии за APS, но честотата им при пациенти с репродуктивни нарушения е незначителна. Мненията за ефекта от наличието на ACLA и анти-ß2GPI антитела върху хода на бременността са противоречиви. От една страна се твърди, че ACLA участва в репродуктивни проблеми, докато от друга страна, ACLA не е свързана с заболеваемост от бременност (11). В нашата група жени честотата на антитела ACLA при жени с репродуктивни нарушения не е значителна (само 0,4%), те винаги се появяват в комбинация с друг тип APLA. Антитела срещу ß2GPI присъстват само в 1,13% от жените в нашата кохорта. Анти-β2GPI се появяват главно в комбинация с фосфатидилсеринови антитела и ACLA. Връзката между ACLA и анти-ß2GPI може да се дължи на това, че ACLA има епитоп върху белтъка ß2GPI, така че те могат да се свързват директно с него. Наличието на два основни типа антитела при безплодни жени увеличава вероятността от развитие на APS, както и по-тежки здравословни проблеми по време на бременност (12).
В нашата група на безплодни жени антителата срещу фосфатидилсерин са най-често срещаните (12,43%). Изследването на Nayfe et al. (2013) и Žigona et al. (2013) заявяват, че фосфатидилсериновите антитела са най-ангажирани с нарушенията на бременността. Антителата към протромбина също бяха повишени. Изотипът на IgM е по-често срещан от IgG, но в повечето проучвания изотипът на IgG е най-свързан с APS. Смята се, че появата на IgM може да бъде свързана с продължаващо инфекциозно състояние (15). IgG
изотипите са свързани главно със загуба на плода в ранните етапи на бременността (16). Антипротромбиновите антитела също имат чести кръстосани реакции с фосфатидилсериновите антитела и такава комбинация е замесена в повишена тромбоза и нарушения на бременността (9). В нашия случай е установено такова комбинирано възникване между фосфатидилсериновите антитела и IgG протромбиновите антитела (при 47,62% от жените) и допълнително открито между фосфатидилсериновите антитела и IgM протромбиновите антитела (при 43,33% от жените). Няколко проучвания показват, че протромбиновите антитела са зависими от фосфатидилсерин, така че се препоръчва както фосфатидилсерин, така и протромбиновите антитела да бъдат скринирани едновременно в един тест с ELISA. Такъв преглед ще подобри качеството на диагностичния тест, като вземе повече антитела, следователно към него
Нашите APLA-позитивни пациенти бяха лекувани с аспирин, LMWH, витамин D и кортикоиди. Няколко проучвания показват, че лечението с аспирин с хепарин или кортикостероиди е по-ефективно от лечението само с аспирин (20,21). След разполагане
Наблюдава се намаляване на антителата към фосфатидилсерин, етаноламин и анексин V. Антителата към ß2GPI и протромбин IgM също намаляват, но това намаление не е статистически значимо. В случай на анти-ß2GPI, това може да се дължи на недостатъчен брой пациенти, положителни за това антитяло. Анти-протромбиновите IgG антитела са се увеличили в сравнение с нивата преди лечението. Тази разлика обаче не е съществена.
Заключение
Антифосфолипидните антитела участват в репродуктивни нарушения при почти една четвърт от жените с репродуктивни нарушения. В нашето проучване показахме честа поява на антитела срещу фосфатидилсерин (12,43%) и протромбин (8,51% - IgM, 5,58% - IgG) при жени с репродуктивни нарушения. За разлика от това, честотата на класическите антитела срещу ACLA и анти-ß2GPI е много ниска (съответно 0,40% и 1,13%). APLA антителата намаляват след започване на лечението при пациенти с повишен APLA (аспирин, витамин D, LMWH и кортикоиди). Лечението също трябва да се поддържа по време на бременност, за да се предотврати спонтанен аборт.
Литература