Човекът е осъзнавал своята уникалност и идентичност в далечното минало. Лицата в популацията се различават по външния си вид, морфологичните си характеристики. Те се различават по височина, размер, дължина и форма на крайниците, цвят на кожата, но най-уникалните черти могат да бъдат намерени при анализа на лицевата част на главата. Измерването на морфологичните параметри, тяхното изчертаване и по-късно заснемане служат дълго време като единствен идентификатор на лица, например след войни, катастрофи или криминални разследвания. За съжаление сходството на индивидите доста често води до грешки с необратими последици. Документирани са множество погрешни съждения, основани на сходството на невинно лице с извършителя.
Разработване на идентификация на лица и демонстрация на сродство
Голяма стъпка напред беше откриването на уникалността на папиларните линии, които в продължение на много години се превърнаха в решаващ фактор за безспорна идентификация. Ситуацията беше още по-трудна при определянето на родството. Папиларните линии на кръвни роднини не показват ясно подобни характеристики и се провалят в това отношение. „Експертни“ мнения за определяне на родството са направени преди няколко десетилетия въз основа на прилагането на знания за наследяването на кръвни групи, измерване и описание на формата на ушите, носа, цвета на очите, разстоянието на очите и т.н. Разбираемо е, че през този период са възникнали голям брой грешки при определяне на родството - особено бащинството.
Развитието на гражданското право, разхлабването на правилата на религията и морала, но също така и усилията за недвусмислено идентифициране на хората след бедствия и военни конфликти доведоха до усилия за допълнително подобряване на процедурите за идентифициране на хората и доказване на биологичната им връзка. Все пак се търси маркер, който е абсолютно уникален за човека и не подлежи на унищожаване дори след обширни интервенции (болест, механично увреждане на тялото). Откриването на системата HLA има значително напреднали знания за идентифициране на лица.
Откриване на кратки повтарящи се последователности
Откриване на полимеразната верижна реакция
Две години след откриването на STR, молекулярната генетика попада в ръцете на друг изключителен инструмент. Mullis откри полимеразната верижна реакция - PCR, която дава възможност да се усили всеки участък от ДНК и да стане видим за по-нататъшно разследване. Първоначалните анализи на PCR продуктите бяха извършени на класическа електрофореза. Тъй като те създадоха модели с огромен брой комбинации, подобни на пръстови отпечатъци, те получиха името „пръстови отпечатъци“, което се използва и до днес (Фигура 1).
Първият реален случай, когато се използва ДНК пръстови отпечатъци, беше да се докаже изнасилването и убийството на две момичета в Лестършир. Биологичните следи бяха анализирани от Алек Джефрис, използвайки метода на ДНК пръстови отпечатъци и бяха успешно сравнени с биологични проби на задържания мъж, което доведе до неговото осъждане. В бившата Чехословакия ДНК анализът е използван за първи път през 1990 г. в случая с убийството на млад студент от университета Masaryk в Бърно, където са иззети капки кръв от вероятен убиец. Новаторското експертно становище, което идентифицира кръвта от местопрестъплението със съмнителния мъж, е изготвено от док. RNDr. Владимир Ферак, ръководител на катедрата по генетика и молекулярна химия, Карлов университет в Братислава, с когото в този брой на стр. Е публикувано интересно интервю за генетичната генеалогия и търсенето на предци. 32. Мнението на този изключителен учен позволи и задържането на най-лошия сериен убиец в историята на Словакия, Ондрей Рига.
Как работи определянето на бащинството?
Както вече споменахме, вариабилността на човешкия геном е огромна. Към днешна дата не са открити две индивиди, които да съответстват на цялата ДНК последователност. Дори при близнаци можем да предположим, че поради мутации, създадени по време на живота, може да има малки разлики между тях. Докато медицинската генетика изучава основно вариабилността на т.нар кодирайки ДНК, криминалистичната генетика се фокусира изключително върху некодиращи региони - вече споменатите STR полиморфизми.
Всяка повтаряща се последователност присъства по двойки в генома. Едната част от двойката е от майката, а другата от бащата. Ако броят на повторенията и за двете копия, получени от родителите и разположени на едно и също място в хромозомата, не е еднакъв, можем да проследим от кой от родителите (баби и дядовци, роднини) произхожда последователността. Ние използваме такива полиморфизми в спорове за бащинство и идентификации.
Ето няколко основни примера. Човекът има тандем повторение от 16/16 повторения (той е наследил от баща и майка последователност, която има 16 повторения на определена комбинация от основи). Жената има подреждането на даденото повторение, например 15/15 (баща и майка са й прехвърлени идентично след 15 повторения на дадената комбинация от основи). Потомството трябва да наследи комбинация от баща и майка, така че може да има само комбинация 16/15.
Ситуацията е малко по-сложна, когато мъжът има например комбинация 16/18. Тогава сперматозоидите му са 50% носители на 16 повторения и 50% носители на 18 повторения. Ако майката носи комбинацията 15/15, потомството ще има 50% вероятност да повтори 16/15 и 50% вероятност да повтори 18/15.
Разбира се, тандемните повторения, чийто брой повторения е еднакъв и за бащата, и за майката, не могат да се използват за определяне на бащинството. Ние ги наричаме неинформативни. В анализа на бащинството или идентификацията на ДНК, ние предпочитаме да използваме тези тандемни повторения, които знаем от опит, че в популацията, от която произхождат тестваните родители, те са най-полиморфни (разнообразни, с различна дължина). Казваме, че такива последователности са информативни.
Колкото по-информативни последователности включваме в теста, толкова по-точен е резултатът. Търговските комплекти, които позволяват анализ на тандемното повторение (STR), работят с голяма точност днес. Стандартът е мултиплекс PCR, който усилва 16 STRs от различни флуоресцентно маркирани локуси. На практика единственият възможен начин да се провали и да се тълкува погрешно резултатът от анализа на STR е мутация в потомството, която би променила повтарящата се последователност, за да съответства на последователността на тествания човек, дори ако той всъщност не е бащата. Но вероятността от такова объркване е нищожна. STR системите са проектирани така, че мутациите да имат честота около 1: 1000. Възможността за мутиране на всички 16 последователности, използвани едновременно за имитиране на генома на тествания човек, дори ако той не е баща, е практически нулева.
Вероятността за съвпадение между две индивиди в популация е 10-17. Ако бащинството на посочения мъж не е изключено, можем да изчислим неговата процентна вероятност. Изследването на 16 STR локуса показва вероятност за бащинство по-голяма от 99,9999%. По този начин чрез генетичен анализ можем да присвоим биологичен материал на конкретен човек с вероятност, която граничи със сигурност.
Повтарящите се последователности, разположени на Y хромозомата, се наследяват непроменени изключително от баща на син като цяло - т.нар. хаплотип Y-STR. Същото е и за мъжете по бащина линия. Потвърждението за родство по линия баща-син е следователно относително лесно, дори не се нуждаем от проба от ДНК на майката.
Женският еквивалент на Y хромозомата е митохондриална ДНК. Тази пръстеновидна молекула се намира в митохондриите и представлява интерес и за човешката идентификация. Митохондриалната ДНК се наследява от майчината линия от майката до нейното потомство (дъщери и синове). Митохондриалната ДНК може да предостави ценна информация за по-отдалечена степен на родство. Примерен пример за неговото използване е анализът на скелетна находка в масов гроб в Екатеринбург, където са идентифицирани останките на руския цар Николай II, императрицата и двете й дъщери - чрез сравняване на последователността на митохондриалната ДНК с живи роднини. Един от тях беше съпругът на настоящата британска кралица Елизабет II, принц Филип.
Подходящият биологичен материал за анализи на бащинството обикновено се получава неинвазивно - чрез стериум от устната лигавица. В по-малка степен се използват проби от кръв, коса и нокти. Рутинно се вземат проби от майката, детето и определения мъж или само детето и определения мъж. Ако вероятният баща е мъртъв или липсва и връзката се потвърди, например, за да се докаже правото на наследяване, събирането на биологичен материал се извършва от баба и дядо от страна на бащата. Анализът на бащинството може да се извърши и преди раждането на дете, от околоплодни води или от хорионни ворсинки.
Pater semper incertus est
За разлика от майката, бащата винаги е несигурен. Статистиката показва, че около четири процента от мъжете отглеждат чуждо дете с убеждението, че то е тяхно собствено. Напротив, около петстотин мъже в Словакия кандидатстват за бащинство всяка година. Правилното определяне на бащинството премахва съмненията между родителите и същевременно е важно при определянето на правата на непълнолетното дете.
Ако делото за отричане на бащинство бъде заведено в съда, той изисква съдебен експерт в областта на съдебната генетика, който да изготви становище. При такава оценка се набляга, inter alia, на точната идентификация на пробите. Тампони или кръвни проби обикновено се извършват от съдебен експерт или друго лице (медицинска сестра) в негово присъствие. Ако това не е възможно, пробите трябва да бъдат взети по такъв начин, че да не поставят под съмнение тяхната недвусмислена идентификация. Ако събирането се извършва от лекар, той трябва да осигури точната идентификация на взетите проби. В допълнение към данните за личната карта, към пробата обикновено се прилага пръстов отпечатък, за да се покаже ясно присъствието на тествания субект.
Ако потенциален баща иска да избегне подобна процедура, той може да вземе проби от себе си и от самото дете (син) (дъщерята също трябва да вземе ДНК проба от майката) и след това да се свърже директно с лабораторията.
Въпреки че тези тестове не се изправят пред съда, те могат да предоставят на мъжа информация дали има смисъл той да се обърне към съда, за да отрече (или, обратно, да потвърди) бащинството. Ако резултатът е недвусмислено изключен или потвърден от бащинството и майката не приеме резултата, мъжът трябва да се обърне към съда и да вземе отново тестовете със съдебен експерт.
Заключение
Забелязахме и забележителни събития при извършване на ДНК тестове. Лекарят поиска уникална идентификация на бащата. Тя постепенно донесе 6 (с думи шест) проби за анализ. Е, няма спорен срещу вкуса, както каза баща ми.
Любопитните със сигурност включват молба за потвърждаване на връзката между майка и дете, изпратена ни от медицинския персонал на родилното отделение. Можем само да се чудим защо.
В това отношение молбата на майка, която е поискала потвърждение за връзката си с дъщеря си, не е абсолютно безсмислена, тъй като й се струва, че детето не прилича на нея ...