Zdravotnícke noviny подготви интервю за MUDr. Петер Крижан, доктор по медицина, медицински генетик, за възможностите за пренатална диагностика в Словакия. Интересно четиво за скрининговите резерви и разликите между теста TRISOMY и TRISOMY test + е достъпно на нашия уебсайт със съгласието на редакторите.

Днес можем да прочетем подробно генетичната информация. Какво може да разкрие настоящата генетична пренатална диагностика? С какви новини разполагаме и кои ще въведем? Говорихме за това и с генетик MUDr. Петър Крижан, CSc.

Как напредва пренаталната диагностика през последните години?

Генетичната пренатална диагностика напредва като всички други генетични методи. Резолюцията се увеличава изключително. Виждаме твърде много от това, което можем да назовем и използваме на практика.

Например при ултразвук описваме това, което виждаме, въпреки че понякога не можем да го назовем точно. Така че можем да опишем всичко, което виждаме и какво не питаме. Но сега възниква въпросът дали ще използваме това, което виждаме по някакъв начин.

Доскоро в лабораторните методи, особено в биохимията и хематологията, си задавахме въпроси, на които отговаряхме или да, или не. Например, пациентът е развил патологичен гликемичен резултат, да или не?

Подобно беше и при най-сериозните заболявания в генетиката, когато попитахме дали болестта е налице или не. Изключение беше най-класическият метод, т.нар кариотип, който в много груба форма (някога много подробна форма) представлява цялата генетична информация на човека, плода.

Това е подобно на разработването на електронни карти. Преди имахме проблем с разпознаването на Братислава от Кошице, а днес вече виждаме регистрационните табели на автомобилите на картите.

Е, как работи днес?

Днес можем да прочетем по-подробно генетичната информация. Можем да го разглеждаме като ултразвук на плода. Така че можем да идентифицираме всичко, което виждаме, а понякога не е нужно да го разбираме напълно.

И това е огромното предизвикателство в момента. Правилно тълкувайте това, което сме открили от изследването. По времето, когато започнахме да разглеждаме хромозомите, маркирани с черно-бели ивици, се притеснявахме, че ако можем да ги интерпретираме всички и да ги използваме на практика с толкова много комбинации.

Днес обаче това е навик. Подробна диагностика не се предлага в много страни по света, също поради финансови причини. За щастие изпълняваме тази мечта заедно с нас.

По този начин какви заболявания може да открие настоящата генетична пренатална диагностика?

Понастоящем можем да преброим случаите, когато питаме за известна диагноза в семейството, която след това установяваме при плода, на пръстите на ръката. По този начин бебето първо трябва да се роди с определена болест, която след това се диагностицира.

Трябва изкуствено да поставим граници. Когато редовно изследваме например проба от плод или бебе след раждането, откриваме много промени. Някои фини типове разлики се броят в хиляди за всеки.

Има обаче и промени, които са неразбираеми. Следователно трябва да знаем с разумна степен на сигурност, че диагнозата и находката са свързани.

Например?

генетиката

Например, когато питаме дали плодът има тризомия 21 и изведнъж откриваме нещо друго, което никой не е задавал, възниква въпросът какво право имаме и при какви обстоятелства да кажем, че сме открили нещо различно.

Например какво, ако открием съмнение за рак при бременна жена? Или подозрението за вирус, който причинява СПИН ... Трябва да носим или да облечем „специални очила“, за да видим само това, което спонсорът иска, или трябва да вземем справедливо решение кога и как да докладваме за тези други открития.

Когато открием малки неща при плода, за които никой не е питал по време на прегледа, трябва да коригираме очилата си, кое от теоретично възможното не искаме да виждаме, тъй като все още не знаем как да го използваме на практика . Трябва да сме готови за втората и третата стъпка.

Например, в случай на откриване на тумор, ние също ще вземем друга проба или ще използваме друг метод, за да проверим това. Следващата стъпка е да се тълкува какво означава това за пациента или за бременната жена и нейния плод. Въпросите ще излязат на преден план дали наистина можем да разберем всичко ...

Какви методи са неинвазивни при пренаталната диагностика?

Засега в Словакия имаме само един неинвазивен пренатален скринингов тест, т.нар Тест за тризомия. В света има само няколко лаборатории, а една от тях е в Словакия. Имаме на разположение и други тестове, но пробата трябва да бъде изпратена в лаборатория в чужбина.

Лабораторните тестове винаги имат някакъв компонент от собствената им работа и иначе са съставени като лего. Така че не правим дадено устройство, например, не смесваме химикали, купуваме всичко и го правим според някаква препоръка.

Част от този процес в теста за тризомия е оригинален, наш, който не е сглобен от закупени части. Оригиналната част се състои от оценка. Резултатите, които устройствата дават, не могат да бъдат оценени от човешкото око или причина, а от качествени компютърни програми.

Четенето на дадения код се повтаря десет милиона пъти. Въз основа на тях, компютърно подпомогната математическа формула трябва да реши дали пробата е подозрителна или не.

Как да разберете?

Създадохме нашите програми с биолози и експерти по биоматематика. Скрининговите методи, в допълнение към ДНК тестовете, работят с възрастта, е част от изчислението. Можем да преизчислим изпитите като нарастваща тенденция.

Ако нищо не се промени в методологията и ако средната възраст на бременните жени се увеличи, това ще означава толкова много индикации за амниоцентеза. Ако вместо това на майка се предложи неинвазивен кръвен тест, броят на амниоцентезата може да бъде намален до четвърт или пета.

Можем също така да кажем кои видове резултати и на каква възраст скринингът от кръвта на майката дава по-голяма стойност на информацията от другите.

Неинвазивният пренатален скрининг тест за тежки фетални тризомии (NIPT) е в обръщение повече от година. Какви са първите ви резултати?

Този тест се превръща в стандартна част от пренаталните стратегии за скрининг и постепенно се прилага в развитите страни по света.

В нашите лаборатории беше проведено валидиращо проучване на NIPT500, чиято цел беше да се определи чувствителността и специфичността на NIPT като пренатален скрининг метод за откриване на тризомии на хромозоми 21, 18 и 13.

От септември 2015 г. до юни 2016 г. изследвахме 474 проби чрез секвениране на целия геном с ниско покритие. Бременните жени, на които е предложено участие в проучването според критериите, предпочитат неинвазивен скрининг пред посочена инвазивна диагностика след генетично консултиране.

Критерии за включване бяха на възраст над 40 години с физиологичен скрининг, граничен биохимичен скрининг и патологично ултразвуково изобразяване. За сравнение на ефективността на улавянето е използвана контролна група от 1257 проби от бременни жени, изследвани по искане на бременни жени срещу заплащане, посочена главно от гинеколог.

При сравняване на резултатите в двете наблюдавани групи идентифицирахме, както се очакваше, по-висок дял на пробите от тризомия в групата NIPT500 - 3,2%, но също така в контролната група беше идентифициран неочаквано висок дял на пробите с тризомия - 1,5%.

Общото откриване на 2% от тризомиите в групата с нисък и граничен риск считаме за потвърждение на опита, който биохимичният и ултразвуков скрининг на тризомии има в Словакия.

Опитвате се да разширите нашия тест за тризомия до тест за тризомия +, който ще включва?

Това е неинвазивен пренатален скрининг тест за определяне на риска от най-често срещаните тризомии, пол, отклонения в броя на половите хромозоми и избрани хромозомни микроделеции на плода от кръвта на майката.

Той може да открие повече хромозомни нарушения. Предвид съдържанието на феталната проба в кръвта на майката и начина, по който разглеждаме пола на плода чрез наличието на мъжки признаци, казваме, че сме определили вероятния пол.

Например, ако една жена очаква близнаци, можем да кажем, че поне едно от децата ще бъде момче.

Чрез удължаване на теста за тризомия ще можем да определим пола или патологията въз основа на определен брой X и Y хромозоми при бременност с едноплодна бременност. Бихме искали също да започнем с известни заболявания, където имаме достатъчно сигурност, за да разграничим това да го гарантира.

В допълнение към T21, T18 и T13, откритите синдроми ще включват например синдром на DiGeorge, синдром на Prader-Willi и синдром на Angelman, синдром на Cri-du-chat, синдром на микроделеция и синдром на Wolf-Hirschhorn.

Бихме искали да продължим по този начин, искаме постепенно да добавим известни заболявания към тестването. Това е разширяване на гледката на пренаталния скрининг за хромозомни дефекти. Тези тестове са еквивалентни на частично скринингови и частично диагностични тестове.

Те обаче все още не са пуснати като диагностични тестове. Ако те са положителни, те също трябва да бъдат проверени чрез изследване на генетичния материал на плода, получен чрез инвазивния метод, чрез вземане на проби от околоплодна течност или хорионни ворсинки.

Нашите биохимични и ултразвукови скрининги имат известни резерви?

Да, и има няколко. Например в това, че препоръката на Министерството на здравеопазването изисква минимум. Следователно лекарят, който предлага на бъдещата майка минимален, в този случай поне показателен тест, който обхваща най-малко реални случаи, следователно не липсва.

Той обаче има тестове, които са в пъти по-добри. Той също несправедливо и не разбира възрастта на бременна жена. Не се приема като обща информация в анамнезата или при изчисленията. Днес някакъв балон се изгражда около възрастта на майката.

Друга забележка е, че използваме методи, които не са толкова точни, колкото неинвазивен генетичен тест от кръвта на майката. Освен това тя е единствената, която работи с генетичен материал по генетичен метод.

Всички останали, като ултразвук, не гледат на генетичен материал или хромозоми. Биохимията от своя страна разглежда само протеините, ензимите, а не генетичния код.

Също така работите по нов метод за определяне на феталната фракция. За какво точно става дума?

Ако искаме да определим кариотипа, обикновено работим с цели кратни на генетичния код. В ядрото на всяка клетка носим цяло копие, цялата информация.

Ако изследваме плода от околоплодната течност или кръвта на майката, имаме безкраен брой копия на пробата. Така че кодът е около десет милиона пъти. Когато клетката се разпадне, тя започва да се разпада на „части“, които попадат в кръвта на бременна жена.

Следователно част от генетичната информация, фрагментите, които циркулират в кръвта на майката, принадлежат на плода. Ето защо говорим за неклетъчна или свободна ДНК. Когато се роди бебе, майката няма ДНК в кръвта си в рамките на няколко часа.

И ние се нуждаем от тази проба, но ако някой я вземе неправилно, съхрани или транспортира дълго време, няма да остане нищо от плодовата проба. Трябва да знаем дела на феталната ДНК, за да сме сигурни, че разследваме какво имаме. Това е една от мерките за качество.

Днес ние знаем лабораторния начин да разберем. Въпреки това попаднахме на възможност да разследваме по-добре. Това е новост, която е свързана с изследванията. Това е нещо между клиничната практика и изследванията.

В Словакия имаме достатъчно генетици?

Зависи какво искаме от тях. Това е изключително взискателна работа. Повечето експерти не познават повечето аспекти на генетиката през целия си живот.

Имаме достатъчно генетици с биологично образование, имаме ограничен брой медицински генетици, но повечето са в пенсионна възраст.

Не става въпрос обаче само за броя, но и за качеството на образованието, уменията и, в случая на генетична клиника, за човешкия подход. Зависи какво искаме от тях. Това е изключително взискателна работа. Повечето експерти не познават повечето аспекти на генетиката през целия си живот.