диагностика

Болестите на легионела - по-тежка до животозастрашаваща пневмонична форма (така наречената легионерска болест), както и по-леката непневмонична форма (така наречената Понтийска треска) - са свързани с излагането на човека на вода в естествен, но особено в изкуствен екосистеми (водни системи, климатични устройства, оборудване за хидротерапия, места за мокро компостиране и др.). Легионелите оцеляват в симбиотични водни съобщества с други бактерии, водорасли и амеби в биофилми при температури 25 - 45 ° C (оптимално 32 - 42 ° C) и при pH 2,7 - 8,3. В случай на неспазване на превантивните мерки за експлоатация на съоръжения, използващи вода за хигиенни, терапевтични, уелнес и промишлени цели, хората с рискови фактори, както и пациентите в болниците са застрашени от вдишване или аспирация.

В Словакия честотата на LCH е ниска, през 1985 - 2015 г. инфекцията е диагностицирана при 117 пациенти, 71 мъже и 46 жени (1,54: 1), предимно на възраст над 50 години. Това беше спорадично заболяване, базирано най-вече на общността и беше доказан и вътреболничният произход на LCH. Ежегодно са докладвани 0-15 случая с максимална честота от 0,26/100 000 през 2014 г. (2). През 2015 г. (3) са регистрирани 14 заболявания (0,24/100 000). Ниският брой на съобщените LCH заболявания може да е свързан и с факта, че диагностиката на легионелоза в Словакия не се извършва рутинно, а само на едно работно място, в местния Институт по епидемиология, Медицински факултет, Карлов университет в Братислава. При епидемиологичното изследване на случаи, включително LCH за пътуване при словашки граждани и чужденци с възможна експозиция у нас, институтът си сътрудничи със съответния RÚVZ, съответно с ÚVZ SR (NRC за легионела в околната среда) и докладва за заболявания на EPIS в Словакия и ECDC.

Етиология

Легионелите са факултативни грам-отрицателни бактерии. Известни са 58 вида легионела, но човешката патогенност е доказана само за 30 вида (4, 5). Най-честите причини за инфекции (80 - 90%) са легионела вид Legionella pneumophila (L. p.) С 15 серогрупи (sk) и 80% от тях L. p. sk 1, по-рядко L. p. sk 3, 5, 6. Други видове са посочени като т.нар Подобни на легионела организми (LLO), само някои от тях (L. bozemanii, L. micdadei, L. dumoffii и L. longbeachae) причиняват инфекции при хора с тежка имунна недостатъчност или хронични заболявания. L. longbeachae е ендемичен в Австралия и Нова Зеландия и представлява до една трета от етиологията на легионелозата.

Легионелите се предават чрез вдишване на воден аерозол и в вътреболничните LCH, често чрез аспирация. Началото на заболяването зависи от няколко фактора, както от страна на пациентите (4, 5), така и от страна на колонизираща легионела. Тяхната вирулентност, асоциация с амеби, път и продължителност на експозицията, видове легионела са важни, а количественият параметър на заселване изглежда по-малко важен. Лицата с рискови фактори (по-напреднала възраст, хронични заболявания, имуносупресия, злокачествени заболявания, никотинизъм, алкохолизъм, диабет и други) са най-изложени на риск. Все още не е установено междучовешко предаване на инфекция, но наскоро беше съобщено за първи път случай на вероятно предаване на L. pneumophila по време на епидемията през 2015 г. в Португалия (6).

Клинична картина

Легионерска болест (LCH) е тежко фебрилно белодробно заболяване, най-често под картината на атипична пневмония, но често се проявява като сепсис с мултисистемна недостатъчност. След 2 - 10-дневен инкубационен период, освен диспнея, суха кашлица и болка в гърдите (4, 5), откриваме и няколко неспецифични симптома (треска, втрисане, главоболие, миалгия, неразположение, умора, объркване, халюцинации) . Плеврит може да присъства при около 40% от пациентите и белодробен абсцес при пациенти с рак. Производството на храчки се наблюдава само при повече от половината от пациентите. Диарията и повръщането се наблюдават при 25-50% от пациентите (7, 8).

Според международните критерии, като потвърдени случаи съобщават за заболявания с изолиране на легионела от биологични проби, с доказателства за легионела антиген в урината на пациента и със серологично доказана Lp.1 инфекция, докато болестите, диагностицирани по други методи, се класифицират като вероятно.

Понтиакова треска (PH) е леко, подобно на грип непневмонично заболяване, което се развива след 1-3-дневен инкубационен период. PH не се лекува с антибиотици и изчезва за 3-5 дни (9).

Диагностика

Диагностика Легионелозата е сложна, особено поради атипични клинични признаци на инфекция и не винаги преобладаващата атипична пневмония (10, 11, 12). Диагнозата се основава по-специално на специфични лабораторни тестове и епидемиологична история (излагане на вода) (13). При съмнение за легионелоза, епидемиологично изследване на фактори на предаване чрез изследване на култивирането на проби от вода от водопроводната мрежа (резервоари за битова гореща вода, мрежови изходи), климатични устройства (охладителни кули, шайби за въздух), басейни, хидротерапевтични съоръжения и термични води. В някои случаи PCR се използва и за изследване на вода (14).

Директни диагностични тестове

Те позволяват диагностицирането в острата фаза на заболяването, по-специално чрез откриване на легионела антиген в урината и откриване на ДНК на легионела чрез PCR/RT-PCR в серума, в пробите на долните дихателни пътища и в урината. Отглеждането на специфични почви остава златният стандарт, но малко се използва поради изискванията за материал и време.

Култивиране

Легионелите са много взискателни по отношение на културата и храненето и е необходимо високо съдържание на желязо и L-цистеин (4, 7,10). Селективни почви BCYEα с антибиотици, култивирани в продължение на 7-10 дни при 35 - 37 ° C с 2,5% CO2 се използват за изолиращи улавяния от бронхоалвеоларен лаваж (BAL), храчки и вода. Ванкомицин и полимиксин В с анизомицин (MWY почва) или циклохексимид (GVPC почва) се използват най-често за потискане на растежа на нежелана микрофлора при изследване на вода в почви, различни от глицин, и за клинични проби (BMPA почви) почви с анизомицин и цефамандол (15). По същата причина пробите трябва да бъдат термично обработени (50 ° C/30 минути) или с киселинен буфер (HCl-KCl, pH 2.2). Легионелите не растат на кръвен агар или на BCYEα почви без L-цистеин. Чувствителността на изследването (Таблица № 1) зависи от вида на пробите, посочени са 10 - 80%, най-висока е от пробите от долните дихателни пътища (11).

Микроскопски методи

Малко използвани, легионела оцветява специално в тъкани в директна имунофлуоресценция само с моноклонални антитела.

Откриване на легионела антиген в урината чрез ELISA

Силно специфичен (95%) (Таблица 1), бърз и чувствителен (70 - 90%) метод (11, 16). Търговските тестове са насочени към откриване на legionella L.p. sk 1 и следователно около една трета от болестите могат да избегнат диагностиката (4, 12). Имунохроматографският анализ се използва по-малко. Около 80% от хората периодично секретират антиген по време на двете форми на легионелоза, но най-често в началото на инфекцията и могат да приключат след терапията или при 50-75% от пациентите 1-2 месеца или по-късно (17). Наблюдава се и корелация на чувствителността на теста с тежестта на заболяването (18).

Откриване на нуклеинова киселина

Праймери, насочени към гените 16S рРНК (19), 5S рРНК (20), 23S рРНК (21) и гена за потенциране на инфекциозността на макрофагите (mip) (22) се използват за усилване на специфични за легионела ДНК последователности в биологични проби (22), но също комбинации 23S-5S рРНК (23). ДНК амплификацията при PCR (Таблица 1) е силно специфична (