абстрактно
Хроничният рецидивиращ мултифокален остеомиелит (CRMO) се характеризира с повтарящи се възпалителни лезии в метафизата на дълги кости и обикновено засяга деца и юноши. Сходството с автозомно-рецесивно мишко разстройство (cmo, хроничен мултифокален остеомиелит) ни накара да извършим семейно-базирано проучване за асоциация с два маркера върху хромозома 18q в региона, хомологичен на локализацията на cmo мишки. Открихме значителна връзка на CRMO с редкия алел на маркера D18S60, което води до относителен риск от хаплотип (HRR) от 18. Това предполага съществуването на ген в този регион, който допринася значително за етиологията на CRMO и демонстрира първо доказателство за CRMO генетична основа. Този ген се различава от RANK, който е мутирал при фамилна експанзионна остеолиза (FEO), но не и при CRMO. Мутационният скрининг в гените RANK и гените PIGN и KIAA1468 доведоха до откриването на два варианта (един в RANK и един в PIGN), които са в неравновесие при свързване с редкия алел D18S60, но не са свързани самостоятелно с CRMO.
материали и методи
пациенти
Двадесет и седем пациенти с CRMO и техните родители са взети от няколко центъра в Германия. Всички пациенти са от немски произход, с изключение на един турски и един хърватски пациент. Диагнозата на CRMO се основава на остеолитични лезии с маргинална склероза при рентгенография, добро общо състояние и нормална кръвна картина. В допълнение, имаше мултифокално и/или характерно място (метафиза на дълги кости или ключица) и/или съпътстваща палмоплантарна пустулоза. Писмено информирано съгласие е получено от всички пациенти и/или техните родители. Протоколът за изследване е одобрен от Комитета по етика на Медицинския отдел на университета в Мюнхен.
Молекулярни изследвания
Статистически анализ
Данните за генотипа за маркери D18S1148 и D18S60 са анализирани статистически чрез два метода за асоцииране, базирани на семейството, относителен риск от хаплотип (HRR) 11 с точен тест на Fisher и тест за неравновесен дисбаланс (TDT) 12 със стойности P, определени с помощта на биномно разпределение с точно биномиален тест. Стойностите на P бяха сравнени с нивото на значимост, коригирано за многократно тестване, като се използва корекция на Bonferroni за два маркера, всеки с пет алела, като се използва коефициент на корекция 5–1 = 4 за броя на алелите, както се предлага от Schaid, 13, умножен по брой маркери (2x4 = 8) (a = 0,05: 8 = 0,00625, a = 0,01: 8 = 0,00125). За всеки маркер тествахме още четири често срещани алела и комбинирахме много редки алели (n ⩽ 3) в петия непроверен алел. За по-нататъшен анализ на хаплотипни данни (вариант PIGN Exon 15, 1692A/T и вариант RANK Exon 9, 971G/A), беше използван точният тест на Fisher за анализ на асоциацията между маркер и вариант и TDT, както е приложен в GENEHUNTER 14 за анализ на асоциацията между CRMO. и хаплотипове.
резултатът
За маркера D18S1148 не се наблюдава разлика между честотите на алелите между предадени родителски алели (алели, предадени на пациенти) и непреведени родителски алели (псевдоконтроли). В един от 27-те псевдоконтроли (54 непрехвърляеми родителски алела), рядък алел (дълъг 166 bp) на маркера D18S60, описан с честота 0,05 в родословията на CEPH, е намерен в хетерозиготно състояние, в един от 27 псевдоконтрола (54 непрехвърляеми родителски алела), но 11 от 27 пациенти пациенти и нито един от родителите не е хомозиготен за този алел). Тази разлика е силно значима (P = 0,0011 A, присъстваща в 6 от 54 предадени и 2 от 54 непреведени родителски алели, няма значителна връзка с CRMO (P = 0,26). Независимо от това, тя е значително свързана с алела D18S60/166. bp (RANK/A присъства в 5 от 12 родителски хромозоми с алел D18S60/166 bp и 4 от 96 без, P = 0 0007).
Хаплотипове D18S60-PIGN-RANK върху предадени и нетранслирани хромозоми на родители на пациенти с CRMO. Дължината на алела D18S60 в bp е показана със съпътстващите алели PIGN1692 (A или T) и RANK971 (G или A), един по един хаплотипите се наблюдават само веднъж или два пъти, обобщени в "други".
Изображение в пълен размер
дискусия
Благодаря
Благодарим на пациентите и техните семейства за участието, G Shen-Ong за полезната дискусия и лекарите за помощта при набирането на пациенти: M Borte, Leipzig, H Girschick, Würzburg, R Häfner, Garmisch-Partenkirchen, T Hospach, Stuttgart, V Jansson, Мюнхен, J и S Killburger, Schalksmühle, RM Küster, Bad Bramstedt, M Mann, St. Августин, J Meister, Aue, D Meyer, Ulm, W Oelkers и B Riedel, Хамбург, KH Pulcher, Hargesheim, M Sailer, Innsbruck, C Schauer-Petrowskaja, Berlin-Buch, F Schilling, Mainz, P von Schönaich, Augsburg, P Schütze, Дрезден.