елементи
абстрактно
Некротизиращият ентероколит (NEC) се характеризира с инфилтрация на макрофаги в засегнатите тъкани. Тъй като чревните макрофаги са получени от набирането и in situ диференциацията на кръвни моноцити в чревната лигавица, ние предположихме, че повишеното набиране на чревни моноцити по време на NEC намалява концентрацията на кръвни моноцити и че това намаляване на кръвните моноцити може да бъде полезен биомаркер за NEC.,
Уча дизайн:
Оценихме медицинските записи на бебета с много ниско тегло при раждане (VLBW), лекувани за NEC, и ги сравнихме със сравнима контролна група бебета с непоносимост към хранене, но без симптоми на NEC. Записани са клинични характеристики и абсолютен брой на моноцитите (АМС). Диагностичната точност на стойностите на AMC беше тествана с помощта на характеристиките на оператора на приемника (ROC).
резултатът:
Сравнихме 69 случая и 257 контроли (медиана 27 седмици, диапазон 26 до 29 и в двете групи). В етап II NEC, AMC намаляват от медиана от 1,7 х 109 l-1 (интерквартилен диапазон (IQR) 0,98 до 2,4) до 0,8 (IQR 0,62 до 2,1); P 9 l-1 (IQR 0, 1, 5 до 3, 2) до 0.8 (IQR 0, 6 до 1, 9); P 20% посочва NEC с чувствителност 0,70 (95% доверителен интервал (CI) 0,57 до 0,81) и специфичност 0,71 (95% CI 0,64 до 0,77).
заключение:
Открихме намаляване на концентрацията на моноцити в кръвта като нов биомаркер за NEC при деца с VLBW.
Хистопатологично NEC се характеризира с наличието на богати на макрофаги левкоцитни инфилтрати, 10 които контрастират с други причини за неонатална чревна дисфункция, като дисмотилитет, илеус, свързан със сепсис, и реперфузия на исхемия. По-рано показахме, че популациите на чревни макрофаги обикновено се поддържат чрез непрекъснато придобиване и in situ диференциация на циркулиращите моноцити в lamina propria. 14, 15 Тъй като недоносените деца имат ограничен кръг от циркулиращи моноцити 16 и нямат значителни резервоари на зрели моноцити в костния мозък или другаде, 17 предположихме, че масивният приток на циркулиращи моноцити в чревната тъкан по време на NEC при недоносено бебе би довел до остро намаляване на моноцитите в периферната кръв и може да помогне да се разграничи ранният НЕК от други причини за непоносимост към храна. За да установим тази хипотеза, сравнихме абсолютния брой моноцити (АМС) в периферната кръв, получени по време на настъпване на непоносимост към фуражи при всички пациенти, лекувани за потвърдени НЕК в нашия център през последните 10 години, и ги сравнихме с броя на сравняваните контроли с хранене. непоносимост по причини, различни от NEC. След това потвърдихме констатациите си при малка група деца с NEC от друг център.
методи
Извършен е ретроспективен анализ на бебета с много ниско тегло при раждане (VLBW), диагностицирани с NEC в болница на Университета на Илинойс от януари 2001 г. до юни 2011 г. след одобрение от Институционалния съвет за преглед. Използвахме вложен формат за контрол на случая, при който децата с диагноза NEC (Bell фаза II или III) 4 и за всеки случай бяха идентифицирани 3-4 контроли въз основа на датата на постъпване (± 3 месеца), гестационна възраст (± 1 седмица ), тегло при доставяне (± 200 g) и наличие на непоносимост към храна, но липса на предполагаеми клинични признаци (болезненост, еритема на коремната стена или коремна маса) и рентгенологични признаци (пневмоза, фиксирана чревна верига, удебеляване на чревната стена и/или портален венозен въздух) ) или хистопатологични данни (коагулационна некроза, пневматоза, бактериален свръхрастеж и възпаление). Непоносимостта към хранене се определя като наличие2 на следните критерии: раздуване на корема, остатъци от хранене - 30% от обема на фуража, повръщане, диария или кървави изпражнения, което води до рентгенологично изследване и временно спиране на храненето. Кърмачета с големи вродени аномалии и спонтанна чревна перфорация през първата седмица след раждането бяха изключени.
Записани са демографски характеристики, включително тегло при раждане, гестационна възраст, пол, етнически произход (афроамерикански, кавказки, латински или друг) и начин на приложение. Ние също така записахме клинична информация, включително резултати по Apgar, сепсис на демонстрирана кръвна култура преди началото на непоносимост към фуражи, централна линия, артериален дуктус, терапия с индометацин, интравентрикуларен кръвоизлив и възраст на поява на NEC или непоносимост към фуражи. Данните, получени от пълна кръвна картина (CBC), включват дата на теста, брой на белите кръвни клетки (WCC), абсолютен брой на неутрофилите (ANC), абсолютен брой на лимфоцитите (ALC) и AMC. Тези данни са получени от датата на настъпване на непоносимост към хранене, от последния наличен CBC, съставен преди началото на непоносимостта към хранене, и от трите следващи CBC. Всички CBC са извършени в клиничната лаборатория на UI на болницата с помощта на автоматизирани броячи на хематология на Siemens-Bayer Advia 2120 (Siemens Medical Solutions, Hoffman Estates, IL, САЩ).
Статистически анализ
Статистическият анализ беше извършен с помощта на софтуера Sigma Stat 3.1.1 (Systat, Point Richmond, CA, USA). Данните са класифицирани като параметрични, ако са изпълнени четири условия: (1) непрекъсната скала; (2) същата разлика между последователни точки от данни; (3) нормалност, оценена чрез теста на Шапиро-Уилк; и (4) дисперсионно равенство, оценено от теста на Левен. Клиничните характеристики са сравнени с помощта на теста Mann-Whitney U, 19, докато честотата на рисковите фактори в различни групи е сравнена с точния тест на Fisher. 20 Нормализирахме стойностите на WCC, ANC, ALC и AMC, записани в началото на непоносимостта към фуража, спрямо последната налична стойност преди началото на непоносимостта към фуража. Серийната кръвна картина се сравнява, като се използва подписаният тест за ранг на Wilcoxon 21 или повторният анализ на разликите в ранга на Friedman. Данните за 22, 23 на AMC са нанесени с помощта на графики на кутията с мустаци на Tukey - Koopman. Всички статистически тестове бяха двустранни и се считаха за значими при P -1 (IQR 0, 98 до 2, 4) до медиана от 0, 8 (IQR 0, 62 до 2, 1); P 109 клетки -1 (IQR 0, 1, 5 до 3, 2) на медиана 0, 8 (IQR 0, 6 до 1, 9); P 
Дългосрочна промяна в абсолютния брой на моноцитите в периферната кръв (AMC) в контролните и некротизиращи ентероколити (NEC) групи. Областите от кутии за хамстери показват AMC в контролите ( а ), ( б ) бебета с NEC етап II и ( ° С ) с NEC етап III. Данните бяха сравнени чрез анализ на дисперсията на повтарящи се мерки на тестовите редове на Dunnett, използвайки AMC преди хранене с непоносимост (FI) като контролна група. CBC, пълна кръвна картина.
Изображение в пълен размер
По-нататък проучихме дали стойностите на AMC, получени в началото на непоносимостта към фуража, могат да разграничат NEC и непоносимостта към храна от други причини. За да се вземе предвид вариабилността на броя на новородените кръвни клетки при новородени, 16 нормализирани AMC при поява на симптомите от последния наличен предсимптоматичен AMC за всяко дете и след това изчислени ROC криви, използващи нормализирани AMC (Фигура 2). Площта под кривата беше 0.76 (95% доверителен интервал (CI) 0.69 до 0.83; P
Диагностична точност на намалените абсолютни моноцити в периферната кръв (AMC) като тест за некротизиращ ентероколит (NEC). Характеристиките на приемника и оператора на съотношението на AMC при кърмачета по време на непоносимост спрямо AMC при последната пълна кръвна картина преди появата на непоносимост към фуражи показват, че> 20% намаление на AMC правилно идентифицира NEC в 76% от случаите (показано по площ под кривата). Стойността на прекъсване от 0,8 (обозначена с пунктирани линии на фигурата) осигурява 70% чувствителност и 70,6% специфичност.
Изображение в пълен размер
За да идентифицираме граничната стойност с максимална диагностична ефективност, изчислихме (чувствителност + специфичност) за всеки нормализиран AMC и избрахме нормализирания AMC = 0.8, който даде най-високата сума от стойности (Youden J статистика) 1, 4 (Фигура 2) . При тази гранична стойност чувствителността е 0,70 (95% CI 0,57 до 0,81), специфичността е 0,71 (95% CI 0,64 до 0,77), положителната прогнозна стойност е 0,43 (95% CI 0,33 до 0,54) и отрицателната прогнозната стойност е 0,88 (95% CI 0,81 до 0,92). Таблица 3 обобщава клиничната ефикасност на този анализ.
Маса в пълен размер
Валидиране на находките при независима група пациенти
В това проучване нашата хипотеза, че NEC е свързана с намалени концентрации на моноцити в кръвта, се основава на нашите предклинични наблюдения на богати на макрофаги инфилтрати в NEC. 10 Тъй като макрофагите при възпалителни стомашно-чревни лезии са получени от кръвни моноцити, 15 стигнахме до заключението, че бързото изтичане на моноцити в лезии на NEC вероятно ще изчерпи ограничен кръг от циркулиращи моноцити при недоносени бебета. Интересното е, че намаленият брой моноцити в кръвта вероятно ще бъде уникална характеристика на NEC. Недоносените бебета с ограничен растеж може да имат нисък брой моноцити, но повечето от тези бебета показват потискане на всички левкоцитни линии и не изолирана моноцитопения.
В нашето проучване новородените в групата с NEC са имали по-късно начало на непоносимост към фуражи в сравнение с контролната група. Контролните деца са имали по-висока честота на сепсис с положителен резултат от кръвна култура и централна линия, което предполага, че коремните симптоми при някои от тези деца могат да бъдат обяснени със свързания със сепсис илеус, който може да достигне връх в по-ранна постнатална възраст от NEC. 43, 44 Въпреки че при неонатални инфекции се наблюдава моноцитоза, не открихме значителна разлика в броя на моноцитите при кърмачета, хранени с непоносимост поради сепсис, в сравнение с други контроли с непоносимост с неизвестен произход. Групата с NEC има общо по-висока честота на системни симптоми, стомашно-чревно кървене и смъртност, което показва по-висока острота на заболяването от контролите.
Основното ограничение на нашето проучване е ретроспективният дизайн, който увеличава риска от пристрастия. Поради ограничения размер на извадката, нашите констатации се нуждаят от допълнително потвърждаване при по-големи/мултицентрични кохорти и при по-големи бебета с NEC. Необходими са и допълнителни проучвания за оценка на ковариатите на майката/новороденото, за които е известно, че са свързани с NEC, като необичайни фетални пъпни доплерови сигнатури и хориоамнионит, процедури за хранене, анемия, трансфузии и инфекции. 46, 47, 48 Значението на AMC при спонтанни перфорации на червата също остава несигурно. Въпреки че повечето неонатолози считат спонтанните перфорации и НЕК за отделни образувания, двете състояния могат да включват клиничен континуум и може да е трудно да се разграничат един от друг въз основа на клинични признаци, хистопатологични находки и дори възпалителни маркери. 49
заключения
Открихме намаляване на AMC като нов биомаркер за NEC при деца с VLBW. В сравнение с последния наличен AMC преди появата на непоносимост към фуражи, рязкото намаляване на концентрацията на моноцити в кръвта може да идентифицира NECs със 76% точност. При дадено дете с непоносимост към хранене, намаляването на AMC с> 20% показва NEC с чувствителност от 0,70 (95% CI 0,57 до 0,81) и специфичност от 0,71 (95% CI 0,64 до 0,77). Този тест предлага висока отрицателна прогнозна стойност (88%), което може да помогне за изключване на диагнозата NEC при деца с непоносимост към хранене от други причини.