абстрактно

ЦЕЛТА: За да се проучи дали подобрения в сърдечно-съдовите рискови фактори, наблюдавани при условия на енергиен баланс след въглеводороден обмен (CHO) за мононенаситени (MUFA) мазнини, също се наблюдават при енергийно ограничени условия.

ДИЗАЙН: Проучване на надлъжната клинична интервенция, използващо два вида диети с ограничено потребление на енергия (-30% от първоначалния енергиен прием) с подобни нива на наситени и полиненаситени мазнини: диета с високо съдържание на СНО (55% енергия на СНО, 10% MUFA) и диета с висок MUFA ( 40% енергия от CHO, 25% от MUFA).

ТЕМИ: Общо 32 пациенти с наднормено тегло (девет мъже, 23 жени, ИТМ: 26-45 кг/м2).

ИЗМЕРВАНЕ: Телесното тегло, серумните липиди, плазменият инсулин на гладно и съставът на фосфолипидните мастни киселини на червените кръвни клетки са измервани в началото и след 8 седмици. Различни параметри на окислителното състояние (плазмени липидни хидропероксиди, общ плазмен антиоксидантен капацитет, плазмена пикочна киселина и витамин Е) и пролиферация на серумни гладки мускулни клетки (SMC) също бяха измерени в тези моменти от време.

Предмети и методи

елементи

Общо 52 пациенти с индекс на телесна маса (ИТМ, kg/m2)> 25 са приети от амбулаторното отделение на Отдела за метаболитни заболявания в Университетската болница в Монпелие след получаване на информирано съгласие. Нито един от пациентите не е страдал от диабет, бъбречно или чернодробно заболяване или е приемал лекарства, които биха могли да повлияят липидния метаболизъм. Общо 18 пациенти са изтеглени (девет на високо въглехидратна диета и девет на високо MUFA диета), тъй като по лични или професионални причини не са били в състояние или не са искали да продължат протокола до последното посещение. Двама са изключени от проучването, тъй като са имали интеркурентно заболяване. Общо 32 пациенти (девет мъже и 23 жени) са завършили проучването за диетична интервенция. Изследването е проведено в съответствие с Декларацията от Хелзинки от 1964 г.

Уча дизайн

Лабораторен анализ

Окислителният статус се оценява чрез измерване на плазмените липидни хидропероксиди, общия плазмен антиоксидантен капацитет, както на липидите (витамин Е), така и на разтворимия плазмен антиоксидант (пикочна киселина). Витамин Е се измерва чрез HPLC, като се използва С18 обратна фаза и изократично елуиране с метанол. 18 Пикочната киселина беше измерена по уриказния метод (Orthoclinical Diagnostic, Issy-les-Moulineaux, Франция). 19 Плазмените липидни хидропероксиди са измерени чрез колориметричен метод, който позволява селективно измерване на липидни хидропероксиди в присъствието на водороден пероксид. Тази процедура, наричана още FOX2, измерва окисляването на желязо до желязо чрез хидропероксиди с количествено определяне на желязо чрез комплексоване с ксиленол оранжево багрило и откриване на получения хромофор при 560 nm. Разликата между третираните с трифенилфосфин плазмени проби за селективно редуциране на хидропероксиди и необработената плазма е мярка за автентични липидни хидропероксиди, при условие че се спазват стандартните условия.

Капацитетът на плазмения антиоксидант се оценява от способността му да редуцира желязото (FRAP), където развитието на интензивен син цвят в резултат на превръщането на Fe (III) -2,4,6-Tri (2-пиридил) s -триазин (TPTZ ) комплекс с Fe (II)) -TTPZ е пряко свързан с количеството на присъстващия редуциращ агент. Стойности без пикочна киселина FRAP стойностите бяха изчислени чрез изваждане на дела на пикочната киселина (измерени концентрации на пикочна киселина в μmol/l × 2) от общия антиоксидантен капацитет.

Култура на гладкомускулни клетки

Пролиферацията на SMC се измерва върху серум, съхраняван при -80 ° С до анализ. Проби от едни и същи субекти (преди и след интервенционното проучване) бяха тествани в същия аналитичен цикъл.

Аортните гладкомускулни клетки са изолирани от мъжки плъхове Wistar, както е описано по-горе. Клетките се инкубират в DMEM/F-10 (Eurobio, Франция), допълнени с 10% фетален телешки серум, 2 mmol/l L-глутамин, 25 mmol/l HEPES, 100 U/ml пеницилин, 100 ug/ml стрептомицин при 37 ° C ° C във влажна атмосфера от 5% CO 2/95% въздух. Клетките бяха идентифицирани като гладки мускули чрез наличието на активен актин на гладката мускулатура. При сливането клетките се отделят с трипсин-EDTA и се субкултивират. В това проучване са използвани клетки от пасажи от три до шест. За експерименти клетките се засяват в 24-ямкови плаки при 40 х 103 клетки/ямка. След 24 часа клетките се инкубират в безсерумна среда, съдържаща инсулин (1 μmol/l, Sigma), трансферин (200 μg/ml, Sigma), аскорбат (0.2 mmol/l, Sigma) и натриев селенит (6.25 ng/ml). Sigma) 48 часа за синхронизиране на етап G0. След това клетките бяха заменени в среда, съдържаща серум (5%) от изследваните субекти. Медиите се промениха веднъж. След 5 дни клетките бяха събрани с трипсин-EDTA, фиксирани в 4% формалин и преброени на компютър Coulter (Epics XL, Франция).

Статистически анализ

резултатът

Спазване на диетата

Таблица 2 показва дневния прием на храна за всеки тип диета. Примерните оферти, описани в тази таблица, са една от седемте оферти, които се редуват по време на 8-седмичния интервенционен период до ниво на енергия от 7,6 MJ/ден. Записан е задоволителен енергиен прием, макар и малко по-нисък от предписания. Приемът на храна (Таблица 3) показва, че процентите на енергия от общите мазнини, CHO и MUFA са значително различни (P 24 наситени мастни киселини или с диференциално освобождаване на наситени мазнини от мастната тъкан по време на загуба на тегло.

Маса в пълен размер

Маса в пълен размер

Маса в пълен размер

Отслабване

Загуба на тегло е -4,4 ± 0,6 kg на седмица 4 и -6,7 ± 0,7 kg на седмица 8 за средно първоначално телесно тегло от 95 ± 3 kg. Няма статистически значима разлика между диетичните групи, независимо от времевата точка след корекция за първоначалното телесно тегло. Загубата на FM на единица загуба на тегло е 0,70, което показва, че загубата на тегло е постигната при приблизително 2/3 за сметка на FM и останалата 1/3 за сметка на мускулната маса, включително мускулите и водата. Това съотношение не е повлияно от състава на диетата. В края на диетичния период се наблюдава значително намаляване на обиколката на талията (P

мазнини

Средни (± sem) промени в нормализирания витамин Е в плазмата след 8 седмици енергийно ограничение (-30% от първоначалния енергиен прием) при две различни диети: HCHO () диета с високо съдържание на въглехидрати (n = 15); и HUF (

Изображение в пълен размер

Разпространение на SMC

В сравнение с изходното ниво, пролиферацията се е увеличила значително след диетата HCHO (+8,9 ± 4,5%, P = 0,024), но остава непроменена след диетата HUF (Фигура 2). Относителните промени в пролиферацията на SMC (%) са в отрицателна корелация с промените в HDL холестерола (r =, 0.37, P = 0.042). В регресионния модел промените в пролиферацията на SMC са отрицателно свързани с промени в съотношението на олеинова киселина към линолова киселина, независимо от промените в HDL холестерола (Таблица 7).

Средни (± sem) относителни промени в пролиферацията на гладкомускулни клетки (SMC) (%) след 8 седмици енергийно ограничение (-30% от първоначалния енергиен прием) с две различни диети: HCHO () диета с високо съдържание на въглехидрати (n = 15); и HUF (

Изображение в пълен размер

Маса в пълен размер

дискусия

Целта на това проучване е да изясни ефекта на хранителните MUFAs върху загубата на тегло, серумните липиди, плазмените концентрации на гладно, антиоксидантния статус и индуцираната от серума SMC пролиферация при лица с наднормено тегло за кратък период (8 седмици) от активното тегло. слоеве.

Настоящите резултати показват, че намаляването на енергийния прием е имало същия ефект върху загубата на тегло, когато MUFAs са заменени с CHO мазнини, без да се променят концентрациите на SFA и PUFA. Липсата на ефект на съдържанието на макронутриенти върху диети с намалена енергия върху загуба на тегло също е докладвано в краткосрочни експерименти за отслабване. 26, 27, 28, 29, 30

Загубата на тегло и състава на хранителните мазнини могат да повлияят на разпространението на SMCs, важно събитие в развитието на атеросклероза. Mata et al 36 показват, че обогатените с MUFA диети намаляват синтеза на ДНК в SMC, но не измерват клетъчната пролиферация. Нашите резултати ясно показаха за първи път, че реакцията на индуцирана от серум клетъчна пролиферация към загуба на тегло зависи от състава на диетата: обогатена с MUFA диета предотвратява увеличаването на пролиферацията, както се наблюдава при диетата HCHO. В допълнение, промените в пролиферацията на SMC са отрицателно свързани с промени в съотношението на олеинова киселина към линолова киселина, независимо от промените в HDL холестерола. Повишеното разпространение в диетата на HCHO обаче беше неочаквано. Подобряването на метаболизма на липидите и глюкозата трябва да намали податливостта към пролиферация, тъй като HDL, антагонист на окисления LDL при атеросклероза, не намалява след диета в тази група. Предполагаме, че промените в нивата на олеинова киселина или в съотношението на олеинова киселина към линолова киселина, както се наблюдават при фосфолипидите на мембранните еритроцити, вероятно ще се появят в плазмените липопротеини и биха могли да имат силен регулаторен ефект върху пролиферацията на SMC.

В заключение показахме, че по време на този 8-седмичен опит за отслабване, 30% намаление на енергийния прием чрез MUFA или CHO има същия ефект върху загубата на тегло, серумния холестерол и инсулина на гладно. Въпреки това, дори при тези условия за ограничаване на енергията, богата на MUFA диета има по-добри ефекти върху серумните концентрации на TG, отколкото богата на CHO диета, което предполага, че богатите на MUFA диети могат да имат дългосрочни сърдечно-съдови ползи. В допълнение, промените в плазмената концентрация на витамин Е и индуцираната от серума SMC пролиферация са в съответствие със защитния ефект на олеиновата киселина върху окислителното състояние и пролиферацията на SMC, т.е. върху сърдечно-съдовия риск. По този начин, комбинацията от загуба на тегло и намаляване на наситените мазнини до реален процент от 10%, както е постигнато в това проучване, оставя възможността за модулиране на разпределението между CHO и MUFA според предпочитанията на пациента, метаболитния профил и хранителната цел, но MUFA прием при пациенти с хипертриацилглицеролемия.