Разпространение и чувствителност към антибиотици Ureaplasma urealyticum и Mycoplasma hominis, изолирани от проби от гениталии и урина, изследвани в периода 2014 - 2017 г. в KNsP Čadca

Резюме:

Урогениталните микоплазми и уреаплазми, по-специално Mycoplasma hominis (M. hominis) и Ureaplasma urealyticum (U. urealyticum), са опортюнистични бактериални патогени, причиняващи урогенитални инфекции при деца и възрастни. В тази работа е оценено разпространението и чувствителността към антибиотици на M. hominis и U. urealyticum, изолирани от генитални и пикочни проби, изследвани в продължение на 3 години, в периода 2014 - 2017 г. в KNsP Čadca.

разпространение

Резултатите показват, че присъствието на тези микроорганизми в патогенезата на урогениталните инфекции е най-често във фертилна възраст при жени и мъже във възрастовата категория над 60 години. От общия набор от 4736 изследвани биологични проби, честотата на урогенитални микоплазми и уреаплазии е регистрирана при 1308 пациенти, което представлява 27,6% (23,7% при жените и 3,9% при мъжете). Най-често се идентифицира U. urealyticum, 77,6%, по-малко M. hominis, само на ниво 4,5%. Доказахме наличието на двата микроорганизма в 17,9% от изследваните биологични проби. Положителните находки на урогенитални микоплазми и уреаплазии бяха тествани върху избрани групи антимикробни средства, които имат терапевтично значение при тяхното лечение. Те са антибиотици от макролидната и тетрациклиновата серия, хинолони от второ и трето поколение, линкозамиди (клиндамицин) и стрептограмини (пристинамицин) също са представени.

В тествания набор от проби от водосборния басейн на KNsP Čadca, антибиотици от серията тетрациклин могат да бъдат препоръчани на първо място в терапията, напр. доксициклин.

Ключови думи: чувствителност към антибиотици, Ureaplasma urealyticum, Mycoplasma hominis

* Всички таблици, графики и фигури, които са част от статията, могат да бъдат намерени в прикачения PDF файл в края на изследването.

Въведение

Урогениталните микоплазми и уреаплазми принадлежат към класа на MoNicutes, който се характеризира с малък размер на бактериални клетки, липса на клетъчна стена и изключително взискателни изисквания за растеж "in vitro". U. urealyticum и M. hominis са опортюнистични вътреклетъчни патогени, които имат афинитет към лигавичните епителни клетки, са разположени перицелуларно, въпреки че могат да проникнат в клетките (1). Те се появяват в урогениталния тракт на пациенти, страдащи от симптоми, включително безплодие, орхит, епидидимит, простатит или негонококов уретрит (2). Те обаче могат да бъдат изолирани и от асимптоматични индивиди (3). Целта на изследването е да се определи разпространението и чувствителността към M. hominis и U. urealyticum антибиотици, изолирани от генитални и пикочни проби от пациенти от болнични отделения и от амбулаторните клиники на KNsP Čadca. Болестите могат да бъдат причинени и от други видове урогенитални микоплазми и уреаплазии (напр. Mycoplasma genitalium, Ureaplasma parvum), които не се идентифицират от използваните диагностични комплекти.

материали и методи

В кохортата бяха включени ендоцервикални, вагинални и уретрални тампони и урина. Биологични проби са получени от пациенти със симптоми на инфекция на урогениталния тракт от водосборния басейн на KNsP Čadca (област Чадца и Kysucké Nové Mesto) от 1 юли 2014 г. до 30 юни 2017 г. (3 години). От общия брой на 4736 изследвани проби, 3661 са от жени. Средната възраст е била 38,2 ± 17,9 години, (диапазон 0 - 90 години, 95% ДИ 18 - 75 години).

И двата анализа бяха оценени след инкубация при 37 ° С в продължение на 48 часа и втори път след 72 часа. Идентифицирането на урогениталните микоплазми и уреаплазии се основава на техните биохимични и метаболитни свойства. В случая на U. urealyticum, уреята се разгражда от уреаза, за да освободи NH3 3, M. hominis разгражда аргинин с аргиназа, освобождавайки NH3, което увеличава рН в течната хранителна среда. Резултатът от идентификацията се оценява според промяната на цвета на индикатора за рН. Тълкуването и определянето на чувствителността към антимикробни средства се основава на инхибиране на споменатата ензимна активност и резултатът се чете по подобен начин според промяната на цвета на индикатора на рН. За всяко антимикробно средство се използват две ямки с различни концентрации на антимикробно средство, с изключение на пристинамицин. Резултатът от чувствителността е разчетен качествено като чувствителен, средно чувствителен или устойчив в съответствие с препоръките на производителите на диагностични комплекти.

Статистическият софтуер SPSS 22 за Windows (Статистически пакет за социални науки вкл., Чикаго, САЩ) е използван за статистически анализи. Тестът на Пиърсън за хибрид за доброта на прилягане е използван за сравняване на случаи на щамове, чувствителни към или устойчиви на различни антимикробни средства. Стойността на вероятността p (0,05) се счита за статистически значима. През целия наблюдаван период 2014 - 2017 г. моноинфекцията с U. urealyticum преобладава над моноинфекцията с M. hominis и смесената инфекция с U. urealyticum/М. хоминис (графика 1).

Поява на урогенитални микоплазми и уреаплазии в различни възрастови групи

Общата положителност на урогениталните микоплазми във възрастовите категории 20 - 40 години е относително по-висока (46,8%) в сравнение с други възрастови групи. Най-високата позитивност при жените е установена във възрастовата група 20 - 29 години през целия наблюдаван период (34,2%). Почти 40% от мъжете с положителни урогенитални микоплазми и уреаплазми през наблюдавания период са били във възрастовата категория над 60 години (37,3%) (Графика 2).

Делът на отделните урогенитални микоплазми и уреаплазии по възрастови категории е показан на Фигура 3. Моноинфекцията на U. urealyticum е най-често при пациенти (мъже + жени) на възраст 20-29 години. Повечето смесени инфекции с U. urealyticum/M. хоминис е бил във възрастовата категория над 60 години и при двата пола (38,9%). Моноинфекцията на M. hominis е приблизително еднаква във всички възрастови категории.

"In vitro" чувствителност на урогенитални микоплазми и уреаплазии към антимикробни средства

Инфекциите с U. urealyticum показаха резистентност към макролидни ATB при 7,3%, към тетрациклинови ATB (миноциклин и доксициклин) при 3,5%, с изключение на тетрациклин (17,4%). Резистентността към левофлоксацин е 14,2%, резистентността към офлоксацин 38,2% и към ципрофлоксацин 68,2%. Резистентността на M. hominis към рокситромицин, еритромицин и кларитромицин е 64,6%. Резистентността към азитромицин е 77,8%, към йозамицин 32,2%. Резистентността към тетрациклин и миноциклин е била 35,8%, към доксициклин 11,1% и към пристинамицин 22,2%. Резистентността към хинолони достига 41,4%, към клиндамицин е 41,5%.

При пациенти с комбинирана инфекция с U. urealyticum/M. hominis, при изследване на смесената култура, наблюдаваме висока устойчивост на макролидни ATB и хинолони на ниво от 74,7%, с изключение на азитромицин (56,7%). Резистентността към тетрациклин ATB е 67,2%, с изключение на доксициклин (38,3%). При комбинирани инфекции с U. urealyticum/M. hominis, резистентността към повечето тествани антимикробни средства е по-голяма от 60%, което показва, че съпътстващата инфекция с U. urealyticum/М. hominis може да се лекува по-трудно от самите инфекции, тъй като те могат да изберат за кръстосана резистентност към антимикробни средства (4) (Таблица 3). Статистическата разлика за всички антимикробни средства е р (5) .

Въпреки че острият цистит е най-честата диагноза, свързана с урогенитални микоплазии и уреаплазии в нашата кохорта (31%), проучвания на други автори съобщават за връзка на тези микроорганизми с интерстициален цистит (6). Възможно обяснение може да бъде, че острият цистит е само началото на интерстициален цистит, който може да се развие при тези пациенти с неадекватно лечение.

Интересна е връзката между инфекциите с микоплазма и уреаплазма и възрастта на пациентите. Най-високото разпространение на урогенитални микоплазми и уреаплазии е регистрирано при жени на възраст 20-40 години и при мъже на възраст над 60 години. Смесените инфекции са най-чести и при двата пола на възраст над 60 години. Те представляват до 48,6%. Изследвания на други автори от цял ​​свят също сочат към положителността на урогениталните микоплазии и уреаплазии в напреднала възраст (78). Обмисля се дали това са недиагностицирани инфекции или колонизиращи инфекции, които пациентите носят от най-ранна възраст, или нови инфекции в областта на хронични възпалителни промени в урогениталния тракт, заедно с отслабена имунна система (9) .

Урогениталните микоплазми и уреаплазми са често срещана флора, открита върху гениталната лигавица на здрави възрастни (1). Появата им обаче е свързана и с патологични процеси като извънматочна бременност, дълбоко възпаление на таза или преждевременно раждане (10). Най-честата форма на предаване на урогенитални микоплазми е полов акт, така че е важно да се лекуват всички сексуални партньори в случай на инфекция. Предаването от майка на дете е възможно и по време на раждане и при пациенти с трансплантация на органи (11). От тази гледна точка е важно да се наблюдава появата на урогенитални микоплазми и уреаплазии в популацията.

Тествахме положителни находки на урогенитални микоплазми върху избрани групи антимикробни вещества, които имат терапевтично значение при лечението им. Това са ATB от макролидната и тетрациклиновата серия, представени са също хинолони от второ и трето поколение от химиотерапевтици, линкозамиди (клиндамицин) и стрептограмини (пристинамицин).

Микоплазмите и уреаплазмите нямат клетъчна стена и следователно са устойчиви на бета-лактамни ATB. Те също така не са чувствителни към сулфонамиди или триметоприм поради неспособността им да синтезират фолиева киселина. Те също могат да бъдат устойчиви на други антимикробни средства, напр. линкозамид, макролид, флуорохинолон или тетрациклин, които са свързани с развитието на различни механизми на резистентност (2). Това може да е промяна в целевите структури, както и изтичане на антимикробно средство, което може да е резултат от генетична мутация или трансфер на нови гени към транспозони. Например, хинолоновата резистентност може да възникне чрез мутация в целевия ензим (ДНК-гираза, топоизомераза IV), а също и чрез промяна на пропускливостта на бактериалната клетъчна мембрана до антимикробен агент. Устойчивостта на M. hominis към макролидни ATBs е резултат от мутации в рибозомни протеинови гени, както и от изтичане на антибиотици (12). Счита се, че подобни механизми участват в резистентността на урогенитални микоплазми и уреаплазии към тетрациклини (12) .

Не винаги е лесно да се разграничи дали урогениталните микоплазми и уреаплазми са причина за остра урогенитална инфекция или колонизация от тези микроорганизми. При целевата антимикробна терапия на рецидивиращи инфекции е важно да се помисли и за тези микроорганизми. За да се намали рискът от неуспех на емпиричното лечение, се препоръчва регионално тестване за антимикробна чувствителност in vitro, тъй като има географски разлики в антибиотичната резистентност. Според данните на SNARS (Словашката национална система за наблюдение на антимикробната резистентност), през 2016 г. чувствителността на U. urealyticum към пристинамицин, доксициклин, тетрациклин и джозамицин е била повече от 90%. Устойчивостта на U. urealyticum към ципрофлоксацин достига 47%. За M. hominis чувствителността е била по-голяма от 90% за пристинамицин, доксициклин и тетрациклин. Резистентността на M. hominis към ципрофлоксацин е 34% (13) .

В тествания набор от проби от водосборния басейн на KNsP Čadca, доксициклин може да бъде препоръчан в терапията на първо място, тъй като в Словакия не са регистрирани пристинамицин, йозамицин и миноциклин. Значителна резистентност на U. urealyticum към ципрофлоксацин и клиндамицин също е потвърдена за нашите щамове. Клиндамицин е полусинтетично производно на линкомицин, срещу което U. urealyticum е естествено устойчив. Високата резистентност към ципрофлоксацин може да се обясни с регионални съотношения и местни практики за антимикробно предписване. Същото може да се каже и за азитромицин и тетрациклини, срещу които сме наблюдавали по-висока резистентност при M. hominis. Високата рецепта и честата употреба на ципрофлоксацин при урогенитални, респираторни, но също и други инфекции могат да доведат до прогресиране на резистентността към този химиотерапевтичен препарат, особено при урогенитални микоплазми и уреаплазми (14). .

Честотата на урогениталните инфекции е свързана с възрастта на пациентите и се диагностицира по-често при жени в детероден потенциал, където те могат да се появят и при коинфекция с хламидиални инфекции.
инфекции (15). При мъжете степента на задържане е по-висока, особено във възрастовата група над 60 години, където обаче е по-често случай на колонизация без клинични симптоми (16) .

Заключение

Понастоящем се използват три групи антимикробни средства за лечение на микоплазмени и уреаплазмени инфекции, а именно флуорохинолони, тетрациклин и макролидни ATB. Нашите резултати показват факта, че жените в детеродна възраст имат по-висока положителност на урогенитални микоплазии и уреаплазии. Възрастта и полът на пациента са рискови фактори за появата на урогенитални инфекции и терапията на тези патогени трябва оптимално да започне въз основа на клиничните симптоми на пациента и определената впоследствие "in vitro" чувствителност към антибиотици. В случай на емпирично лечение е необходимо да се вземат предвид съвременните регионални тенденции в антимикробната резистентност.