абстрактно
Изследвахме ефектите от лечението на епилептикус (SE), индуциран от литий и пилокарпин на 15-ия ден след раждането (P15) или 28 (P28), върху тежестта на острата SE и SE-индуцирана епилептогенеза. Плъховете са получавали топирамат (10 или 50 mg/kg, IP) или диазепам (5 mg/kg, IP) 20, 40 или 70 минути след пилокарпин и три месеца след SE 24-часов ЕЕГ/ЕЕГ видеозапис за един (P28). ) или в продължение на две седмици (P15) непрекъснато.
При плъхове P15 топирамат не променя хода на SE, но лечението на 20 или 40 минути напълно предотвратява появата на спонтанни повтарящи се припадъци (SRS), докато по-късно лечението (70 минути) е частично ефективно за намаляване на тежестта и честотата на SRS . Диазепам е бил ефективен срещу остро SE при всички изпитвани времеви точки. Ранното (20 минути), но не късното лечение с диазепам доведе до намаляване на честотата и тежестта на SRS.
При плъхове P28 и двете лекарства намаляват кумулативното време на припадъци. Ранното лечение (20 минути) с някое от лекарствата намалява честотата на хронична епилепсия. Късно лечение (40/70 мин.) Не променя честотата на SRS, но намалява тяхната честота. Това проучване показва, че при лечението на SE антиконвулсантните и антиепилептогенните ефекти могат да бъдат разграничени по специфичен за развитието начин: топираматът е антиепилептогенен, без да е ефективен антиконвулсант при P15 животни при тестваните дози. От друга страна, диазепамът е по-добър антиконвулсант от антиепилептогена при P15 животни при тестваната доза. Такива ефекти не са наблюдавани при по-възрастни животни.
Основното
Status epilepticus (SE) е често срещано неврологично състояние. SE е често срещано при кърмачета и малки деца, като повече от 50% от случаите на SE се срещат на възраст под 2 години (1, 2).
SE е свързано с повишен риск от развитие на епилепсия. При 30% от децата, които са развили SE, е установено, че епилепсията се развива впоследствие (3). Наскоро 41% от пациентите с остра симптоматична SE (една трета от децата) са развили епилепсия през следващите 10 години (4).
SE-индуцираната епилептогенеза е често срещана при възрастни животни и има значителни експериментални доказателства за появата й в незрелия мозък (5-9).
Клиничният подбор на антиконвулсанти традиционно се основава на способността им да блокират експресията на гърчове, но неотдавнашното наличие на антиепилептични лекарства (AED), насочени към много нови молекулярни цели (10), предизвика интерес към изучаването на техния потенциал да бъдат антиепилептогенни (например намаляване на епилепсията) ) или модификация на заболяването (например намаляване на тежестта на епилепсията). Правени са ограничени опити за изследване на антиепилептогенния потенциал на съществуващите антиконвулсанти. Хроничното лечение на хора с фенитоин или валпроева киселина за предотвратяване на посттравматична епилепсия не е било успешно (11, 12). Въпреки че някои проучвания с животни са използвали хронично медикаментозно лечение по време на латентния период след SE, за да се предотврати развитието на епилепсия, малцина са имали положителни резултати (13-16). От друга страна, острото лечение на SE при възрастни плъхове понякога може да предотврати или намали тежестта на хроничната епилепсия. (16–19), но ефектът на антиконвулсантите върху епилептогенезата не е проучен при незрели животни.
Тествахме ефикасността на топирамат или диазепам при острото лечение на литий/пилокарпин SE на два различни етапа на развитие на мозъка на плъхове: ден след раждането 15 (P15) и ден след раждането 28 (P28). Тези възрастови категории приблизително съответстват на детството и детството преди юношеството (20). Тествахме ефекта на острото лечение върху краткосрочен (тежест на SE) и дългосрочен функционален резултат (антиепилептогенен или модифициращ болестта ефект).
методи
Животните.
Използвани са мъжки плъхове албиноси Wistar (Simonsen Lab, Gilroy, CA), на 15 или 28 дни (P15 и P28). Денят на раждането се счита за ден 0. Кученцата са отбити на P21.
Всички животни бяха настанени в стая с контролирана температура и влажност с 12-часови светлинни и тъмни цикли (светлинният цикъл започва в 7 часа сутринта) и имаха свободен достъп до храна и вода. Всички експерименти бяха проведени със съгласието и в съответствие с разпоредбите на Институционалния комитет за грижа и използване на животните в Медицински център Западен Лос Анджелис VA.
Имплантиране на електроди.
Животните бяха упоени с халотан. След това триполярният електрод беше прикрепен към винтовете на черепа (първите два бяха вкарани в черепа над дясната и лявата предна кора, третият беше поставен над малкия мозък) и закотвен със зъбен цимент. Първите два проводника регистрираха ЕЕГ през полукълбите; третият е използван като основа. След операцията животните бяха поставени в наблюдателна камера на температурна подложка, докато не се възстановят. Малките плъхове P15 се върнаха при майка си след възстановяване.
Индукция на SE и приложение на носител: диазепам или топирамат и/или атропин.
Литий (3 mg/kg) се прилага интраперитонеално в деня на операцията и 20 часа по-късно SE се индуцира с sc пилокарпин (60 mg/kg). Дозата на пилокарпин е определена от Sankar (5) за възрастовите групи, използвани в нашето проучване. Измерва се началото на първата иктална активност и непрекъсната полиспайкова активност. Контролната група беше третирана 70 минути след пилокарпин с носител и атропин в количества, достатъчни да блокират повечето от ефектите на пилокарпин (10 mg/kg). В резултат на това, ако лечението беше ефективно, оригиналният холиномиметик, който доведе до индукция на SE, вече не беше в състояние да рестартира гърчовете. В други групи топирамат (10 или 50 mg/kg, разтворен в 10% DMSO) или диазепам (5 mg/kg) се прилага интраперитонеално с атропин сулфат (10 mg/kg), 20, 40 или 70 минути след приложението. пилокарпин. Атропинът, разтворен в DMSO или физиологичен разтвор, има сходни ефекти върху тежестта на SE; двете групи бяха свързани. Контролната група „no SE“ получи само литий и превозно средство. Всички животни бяха рехидратирани с физиологичен разтвор приблизително 5 часа след SE (10% телесно тегло, sc). Телесното тегло се проследява ежедневно в продължение на 10 дни след SE.
Остър видео-ЕЕГ мониторинг.
Използвахме модифицирана скала от Haas (21): 0) поведенчески арест; 1) орално затваряне; 2) люлеене на главата; 3) съсирек на главата), 4) двустранни предни крайници на клонинга; 5) клонинг с размножаване и падане; 6) диво бягане и скачане с вокализация; 7) тон.
Хроничен видео-ЕЕГ мониторинг.
Статистически анализ.
Всяка група за остри експерименти се състои от най-малко пет животни, а за хронични опити всяка група се състои от поне шест животни. За остри експерименти бяха проведени статистически сравнения, като се използва дисперсионен анализ за множество сравнения с post hoc теста на Bonferroni за параметрични и post hoc тестовете на Dunn за непараметрични данни. За хронични данни са използвани планирани сравнения с корекция на Bonferroni и корелации. Всички тестове бяха проведени с помощта на статистически софтуер (Sigmastat, Jandel Scientific). P стойности
Ефект от лечението с топирамат (10 mg/kg) или диазепам (прилаган 70 минути след пилокарпин) върху тежестта на литий/пилокарпин SE при плъхове P15. (A) Времево действие на ефектите на топирамат, диазепам и/или атропин върху припадъчната активност (време на припадъци чрез отчитане на междинно време) атропин (•); топирамат + атропин (○); диазепам + атропин (▴) (В) Представителна ЕЕГ, записана от черепни електроди при плъхове Р15, събрани 25 минути и 2 часа след инжектиране на топирамат, диазепам и/или атропин. Ценностите са средства.
Изображение в пълен размер
Лечението с 5 mg/kg диазепам незабавно потиска поведенческите припадъци, съкращава непрекъснатата активност на полиспайк, намалява кумулативното време на припадъци и общото време на припадъци, продължителността на SE и броя на гърчовете във всички тествани времеви точки (Таблица 1; Фиг. 1 A, B),
Ефект от лечението върху епилептогенезата.
При изпитване 3 дни след SE, 75% от атропиновите животни са показали SRS със средна оценка на припадъците 1,6 ± 0,6.Средната честота на пристъпите е 1,4 ± 1,1 пристъпи/ден със средна продължителност на пристъпите 12, 8 ± 4, 9.
Ранно лечение с топирамат (10 mg/kg) (на 20 или 40 минути) напълно защитено и късно лечение (на 70 минути) частично защитено срещу развитието на SRS (1/7 плъхове са имали 1 изолиран неконвулсивен припадък) (Таблица 2, Фиг. 2 А, Б). Топирамат също значително намалява честотата на скокове в сравнение с атропиновата група (Таблица 2).
Маса в пълен размер
(A) Остра срещу хроничен изход от остро лечение с топирамат (10 mg/kg) или диазепам, прилаган 20, 40 или 70 минути след пилокарпин при плъхове Р15. Топирамат не намалява кумулативното време на припадъците, но блокира развитието на SRS. Диазепам намалява кумулативния припадък и не предотвратява развитието на SRS, атропин (.); топирамат + атропин (□); диазепам + атропин (□). (B) Ранното лечение само с диазепам (20 минути) намалява честотата на SRS. * стр
Ефект от лечението с топирамат (10 mg/kg), дадено 20, 40 или 70 минути след пилокарпин върху тежестта на литий/пилокарпин SE при плъхове P28. (А) Зависим от времето ефект на лечението с топирамат (10 mg/kg), прилагано 20, 40 или 70 минути след пилокарпин върху активността на гърчовете на SE при плъхове P28, атропин (•); 20 минути топирамат + атропин (○); 40 минути топирамат + атропин (□); 70 минути топирамат + атропин (▪). (Б) Представителни записи на ЕЕГ, направени 90 минути след лечение с топирамат и/или атропин. Непрекъснатата активност на полиспайк се запазва в 70-минутния контрол на топираматното животно и атропина, докато единична пикова активност се наблюдава в 20 или 40-минутния контрол на топираматното животно. Ценностите са средства.
Изображение в пълен размер
Диазепам потиска поведенческите припадъци, съкращава непрекъснатата активност на полиспайк и намалява кумулативното време на припадъци във всички тествани моменти от време (Таблица 1).
Ефект от лечението върху епилептогенезата.
Когато са записани 3 месеца по-късно, 92% от контролните атропинови животни са развили SRS със средна тежест на гърчовете 2,8 ± 0,6 и 69% от животните са получили гърчове (етап 3-5). Средната честота на припадъците е била 17,5 ± 5, 1 пристъпа/ден със средна продължителност на припадъците 26,9 ± 7,3 s.
Ранното лечение с топирамат (10 mg/kg) или диазепам (5 mg/kg) намалява честотата на пристъпите (таблица 2, фиг. 4В) и значително намалява честотата на хронична епилепсия (таблица 2): 17% в сравнение с двете групи до 92 в контролите на атропина. Късното лечение (40 и 70 минути) не променя честотата на хроничните повтарящи се припадъци, но намалява тяхната честота (Таблица 2, фиг. 4В). Топираматът е по-ефективен за намаляване на тежестта на острата SE при плъхове P28 в сравнение с плъхове P15, но намаляването на SRS е много по-голямо при по-младата група (фиг. 4А).
(A) Остра срещу хроничен изход от остро лечение с топирамат (10 mg/kg), прилаган 20, 40 или 70 минути след пилокарпин при P15 или при P28 плъхове. Топираматът е по-добър антиконвулсант, когато се прилага на плъхове Р28; топираматът е антиепилептогенен при плъхове Р15, (В) Ефект от лечението с топирамат (10 mg/kg) или диазепам по време на SE върху плъхове Р28 върху епилептогенезата, оценен 3 месеца по-късно. Ранното лечение (20 минути) беше частично защитено от развитието на SRS и значително намали честотата на SRS. Късното лечение (40 или 70 минути) намалява честотата на SRS (ефект, модифициращ заболяването). * p P15, P28: