елементи

абстрактно

При липса на лабораторни биомаркери, които корелират с клиничния успех на алергенната имунотерапия, клиничните параметри, т.е. обективни резултати от лекарства, субективни визуални аналогови оценки и проблеми с перкутанните, конюнктивалните и дихателните алергени, са актуални методи за определяне на ефектите. имунотерапия с алергени. От тези алергенни провокации в камери, предизвикващи алерген, златният стандарт е 16, 17, 18. Напоследък се използва камера за предизвикване с алерген за околната среда, за да се демонстрира клиничната ефикасност на HDM сублингвална таблетка. След 6 часа експозиция общият резултат на назалните симптоми е основната крайна точка, общият резултат на очните симптоми и общите симптоми регистрират вторични крайни точки в това проучване. В това проучване бяха изследвани проби от това клинично проучване.

Следователно, ние предположихме, че успешната алергенна имунотерапия може да неутрализира ефектите на алергенната стимулация върху еритроцитите и неутрофилите и може да корелира с клиничното подобрение. Следователно целта на това проучване беше i) да потвърди наблюдаваните по-рано промени в броя на кръвните клетки с друг алерген, HDM, в камерата за излагане на околната среда и ii) да сравни лабораторните параметри за еритроцитите и гранулоцитите преди и след експозиция на HDM при пациенти с AR, лекувани със SLIT спрямо плацебо 15 .

резултатът

Характеристики на субекта

Маса в пълен размер

Индукция на алергени и еритроцити

Абсолютен брой еритроцити, стойности на хематокрит (стр

прах

Интересното е, че също така наблюдавахме промени в MCH и MCHC с противоречива статистическа значимост при анализа на подгрупите. Тъй като MCH и MCHC са изчислени лабораторни стойности в зависимост от концентрацията на хемоглобина и броя на еритроцитите (MCH) или хематокрита (MCHC), ние отдаваме тези открития на значително намаляване на броя на еритроцитите и хематокрита в сравнение с по-стабилните нива на хемоглобина.

В нашето проучване няма значителни разлики между субектите от женски и мъжки пол, различни от известната зависима от пола физиологична разлика в броя на еритроцитите, нивата на хемоглобина и хематокрита. Въпреки че във всички подгрупи на лечението бяха открити подобни тенденции, статистическата значимост не винаги беше постигната след по-нататъшно подразделяне на мъже и жени.

И накрая, само броят на еозинофилите корелира със статуса на лечение на индивидите. След излагане на алерген, броят на циркулиращите еозинофили и в двете HDM SLIT групи остава непроменен, но леко намалява в групата на плацебо. Набирането на еозинофили от кръвта и тяхното спиране върху активиран ендотел и екстравазация е описано при алергични заболявания на дихателните пътища 23, 35. Има различни обяснения за механизмите на алергенната имунотерапия. T regs 36 и B regs 37 като източници на имуномодулиращи цитокини IL-10 и TGFβ действат срещу доминирането на Th2 цитокини при алергия, включително Th2 цитокин IL-5. IL-5 е важен активатор за еозинофилите и действа в носната лигавица, особено при късна алергична реакция 38. Както наскоро беше показано в модел на мишка 39, SLIT може да допринесе за цялостно по-ниско Th2 пристрастие.

заключение

Доколкото ни е известно, това е първото проучване, което разглежда броя на периферните кръвни клетки след алергенна стимулация при пациенти с AR след специфична имунотерапия. Като цяло нашето проучване показа, че (i) броят на циркулиращите еритроцити намалява значително след специфична експозиция на алерген при лица с алергичен ринит, вероятно поради индуцирана от левкотриен еритоза; (ii) броят на левкоцитите, особено сегментираните неутрофили, се увеличава след стимулация с алерген, независимо от предишната имунотерапия; (iii) лекуваните с плацебо субекти - вероятно компенсаторни - имат по-високи изходни нива на еритроцитите, отколкото пациентите след ефективно лечение със SLIT, (iv) само еозинофилната динамика се различава между субектите, получаващи имунотерапия, и субектите, получаващи плацебо. Тези наблюдения са в съответствие с предишните ни констатации за динамиката на червените кръвни клетки след алергенна стимулация и предполагат участието на еритроцити и неутрофили в острата алергична реакция.

методи

елементи

В това проучване с моноцентрични заболявания, при здрави индивиди (n = 77) с анамнеза за алергия към HDM, те са проведени във Виенската камара за предизвикателства (VCC) 15 .

Сенсибилизацията към алергени към HDM (Der p, Der f или и двете) беше оценена чрез специфична оценка на IgE и предварително изследване на кожни убождания. Всички субекти преди това са участвали в рандомизирано, двойно-сляпо, фармакологично проучване на дозозависимата ефикасност на HDM сублингвални имунотерапевтични таблетки 15 и са получавали или ниска доза (6 DU), или висока доза (12 DU) HDM сублингвална имунотерапия (MK) сублингвална имунотерапия. -8237 [Merck/ALK-Abelló]) за общо 24 седмици. Данните, представени в това проучване, са оценени при доброволци 3 до 16 месеца (⦰ 8, 4 месеца) след края на проучването MK-8237 (24 седмици SLIT и още 2 седмици проследяване). (Таблица 1) Алергенните предизвикателства пред HDM са одобрени от етичната комисия „Österreichische Arbeitsgemeinschaft für Klinische Pharmakologie“ (1811/2013) и събирането на данни се извършва между 11/2013 и 10/2014 с доброволни субекти след получаване на писмено информирано съгласие на всеки участник., Всички изследвания върху VCC се извършват стриктно в съответствие с GCP (Добра клинична практика).

Критерии за включване

възраст 18 - 65 години

здрави субекти, с изключение на алергичен ринит и интермитентна или лека астма, която не изисква лечение и е свързана с нормална изходна функция на белите дробове (FEV1 ≥ 70% прогнозира)

положителен тест за убождане на кожата (покритие ≥ 3 mm в сравнение със стандартния контрол [физиологичен разтвор]) и специфичен IgE (≥ 0,7 kU/l, клас на радиоалергосорбентен тест [RAST] ≥ 2) резултати за Der pa/или Der f през последните 12 преди начало на проучването

Критерии за изключване

аномалии в носа (перфорация на преградата, полипи, малформации)

симптоми на настинка или остри инфекции на горните дихателни пътища в рамките на 3 седмици

активно респираторно заболяване, различно от лека астма, което не изисква лечение

продължаваща имунотерапия и/или имуномодулиращи лекарства

интервенции

Предизвикателство за алергенните дихателни пътища

Смес от равни части от цялото тяло на Der p и Der f (Allergon, Thermo Fisher Scientific, Ångelholm, Швеция) и по-малка част от екстракта от дерматофагоидни изпражнения (Citeq Biologics, Groningen, Холандия) (10: 10: 1 ratio) се използва за провокиране на алергени в предизвикателната камера. Алергенните продукти, използвани за сместа, са предоставени от съответните им производители, включително сертификати за анализ, и са съхранявани при +2 до +10 ° C (цели тела) или замразени при -25 ° C (фекалии) в оригиналната опаковка. Предизвиканието на алергена за дихателните пътища се извършва във VCC (54 m 3 запечатана камера за предизвикване) в продължение на 6 последователни часа, както е описано по-горе. (21) Концентрацията на въздушната смес от алергени HDM се наблюдава и поддържа постоянна. Алергичните симптоми се оценяват на всеки 15 минути, т.е. общата оценка на назалните симптоми (TNSS - кихане, запушване, ринит и сърбеж в носа). Освен това, на всеки 30 минути обемът на въздуха-носител (активна предна риноманометрия) и на всеки 60 минути се оценяват стойностите на обема на бронхиалния въздушен поток (спирометрия) от съображения за безопасност.

Събиране на кръвни клетки

Кръвта се събира непосредствено преди и след 6 часа експозиция на алерген от периферните вени и се взема проба в епруветки, покрити с етилендиаминтетраоцетна киселина (EDTA). EDTA кръвните проби се съхраняват за кратко при +2 ° C до +10 ° C и се изпращат в сертифицирана по ISO 9001 лаборатория (Labors.at, Виена, Австрия) за диференциален анализ на кръвни клетки и определяне на хемоглобин [Hb] и хематокрит [Hc ].

Статистически анализ

Данните бяха анализирани чрез ANOVA (ограничена параметризация на сигма ограничение) с три фактора: група (плацебо, ниска и висока доза) и пол, както между субектите, така и преди/след предизвикателната доза като фактор в субекта. Сравнението с плацебо беше извършено с помощта на линейни контрасти. Нормалността на остатъците е тествана чрез тестове на Колмогоров-Смирнов с корекция на Lilliefors. Хомогенността на вариациите е тествана чрез тестовете на Levene. Трансформацията на Arcsin е използвана за относителния брой на белите кръвни клетки. За всички статистически тестове, стр